XIAP抑制剂对耐药细胞株SGC7901/VCR的作用研究

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目的:观察X染色体连锁的凋亡抑制基因(X-linked inhibitor of apoptosis protein gene, XIAP)的小分子抑制剂信筒子素(Embelin)治疗人胃癌耐药肿瘤细胞株SGC-7901/VCR的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外HE、Wright’s染色观察人胃癌耐药细胞SGC-7901/VCR和亲本细胞SGC-7901的细胞形态;运用MTT测定耐药细胞的耐药分数;体外将XIAP小分子抑制剂Embelin分别作用于细胞株SGC-7901、SGC-7901/VCR,采用RT-PCR测定XIAP基因,RT-PCR、Western blot测定XIAP、GST-π的蛋白水平;MTT法检测SGC-7901、SGC-7901/VCR对VCR,Embelin, VCR+Embelin的敏感性,并计算中效浓度IC50、合用指数CI;体内将长春新碱、信筒子素及其两者联合作用于人胃癌SGC-7901、人胃癌耐药细胞SGC-7901/VCR的裸鼠移植瘤,观察对移植瘤、脾脏重量的影响和有无全身副作用的发生。结果:体外实验:MTT显示人胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR的耐药指数为CI=48.17,人胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR:VCR IC50=2.39μM, Embelin IC50=6.34μM,联合用药IC50=6.48μM;胃癌细胞株SGC7901:VCR IC50=0.05μM Embelin IC50 =6.37μM,联合用药IC50 =0.04μM;SGC7901/VCR、SGC7901对单用Embelin的敏感性两者无明显差异,无统计学意义(P>0.05),耐药细胞株SGC-7901/VCR合用指数CI在不同的抑制率均大于1;RT-PCR显示SGC-7901/VCR的XIAP mRNA明显增强,与SGC-7901比较差异有统计学意义(P<0.05);Embelin作用后其表达明显下降(p<0.05)。体内实验: VCR组, Embelin组及联合用药组在人胃癌耐药细胞的移植瘤重量抑瘤率分别为40.28%,88.58%,48.43%。结论:XIAP小分子抑制剂Embelin对耐药细胞有效,不产生交叉耐药性,可用于对常规化疗药物耐药的肿瘤治疗,其机制可能与XIAP的抑制从而启动凋亡途径,另一方面可能与GST-π下降有关;但Embelin联合常规化疗药物VCR作用于体内、体外人胃癌耐药细胞均未显示出协同作用。
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