论文部分内容阅读
蛋白质做为一种重要的生命物质,在催化生命体内各种反应,调节代谢行为,抵御外来物质入侵与控制遗传信息等生命活动中都发挥着重要作用,因此蛋白质是生命科学中极为重要的研究对象。对复杂基质中的蛋白质进行快速、高效的分离鉴定,是蛋白质组学研究中的关键步骤。本论文将功能化修饰后的氧化石墨烯引入蛋白质的分离,建立白蛋白的选择性固相萃取分离过程,拓展了氧化石墨烯在生命科学领域中的应用范围。第一章简要综述了蛋白质分离纯化和结构测定的分析方法,氧化石墨烯的性质及其在生物分析化学领域的应用进展。第二章制备和表征GO-PEG-FeOOH复合材料。采用共价聚合物功能化方法制备聚乙二醇(PEG)修饰的氧化石墨烯,将所得产物与Fe3+发生水解反应,在氧化石墨烯表面原位生长FeOOH纳米棒,从而得到GO-PEG-FeOOH复合材料,并采用红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS)、高分辨透射电镜(HRTEM)和原子力显微镜(AFM)等手段对复合材料进行表征。第三章以GO-PEG-FeOOH复合材料为吸附剂实现了白蛋白的选择性分离纯化。在pH=9的条件下,100 μL 0.71mg mL-1的GO-PEG-FeOOH复合材料对200 μL 50 mg L-1血清白蛋白吸附效率为91%,吸附行为符合Langmuir模型,最大吸附容量为1377.41 mgg-1。吸附的牛血清白蛋白可以用稀释10倍pH=12的B-R缓冲溶液进行洗脱,洗脱率为67%。圆二色光谱表明GO-PEG-FeOOH复合材料具有良好的生物相容性,在吸附洗脱过程血清白蛋白的构象并没有发生改变。将所建立的方法用于人全血中白蛋白的选择性分离,纯化后的样品采用SDS-聚丙酰胺凝胶电泳进行纯度验证,结果表明经该方法分离纯化得到的白蛋白纯度较高。