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第一部分 芒果苷改善高脂饲料诱导的小鼠主动脉损伤 目的：长期的高脂饮食可以导致血脂升高;引起高脂血症的发生。高血脂可以引起血管内皮损伤;继而导致心血管功能紊乱;致使心血管疾病的发生。血管内皮损伤是导致心血管疾病发生的重要因素之一。芒果苷（Mangiferin;MAN）属双苯吡酮类黄酮类化合物;主要来源于百合科多年生草本植物知母的干燥根茎。现代药理学研究表明;芒果苷有止咳平喘祛痰、免疫抗炎镇痛、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗癌、抗糖尿病、抗菌、抗病毒等多种药理活性;但是芒果苷在高脂导致的内皮细胞损伤中的作用研究未见报道。 方法：本研究采用高脂饲料诱导C57/BJ6雄性小鼠建立血管损伤模型;通过检测小鼠血清中血脂等生化指标及血管内皮HE染色;研究芒果苷对高脂饲料喂养的小鼠血脂、主动脉的影响作用;明确芒果苷在血脂调节及主动脉中的保护作用。 结果： 1. 与正常组相比较; 高脂模型组小鼠胆固醇、甘油三酯水平明显升高;与正常组具有显著性差异。同时高密度脂蛋白胆固醇明显下降;低密度脂蛋白胆固醇显著升高;小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-6也明显升高;而芒果苷对小鼠血脂及炎性因子具有显著改善作用。 2. 与正常组相比较;高脂模型组小鼠血清NO水平明显降低;与对照组具有统计学差异。而给予低、高剂量的芒果苷后NO水平均明显上升。阳性对照药可改善小鼠血脂水平;但对IL-10及NO水平没有显著影响。 3. 组织病理学结果表明正常对照组小鼠血管内皮完整;中膜可见梭形平滑肌细胞;弹力纤维清晰完整;呈环形排列;外膜为薄层疏松结缔组织；而高脂饲料喂养的模型小鼠主动脉内膜增厚;弹力纤维部分呈不连续分布、排列紊乱;主动脉壁显著增厚。给予低剂量芒果苷后小鼠血管内膜增厚现象明显减轻;内皮完整度较好。给予高剂量芒果苷后小鼠血管内膜未见明显增厚;内膜较光滑;阳性对照药组未见明显内膜增厚。 第二部分 芒果苷通过上调NO改善ox-LDL对血管内皮的损伤 目的：氧化型低密度脂蛋白（ oxidized low density lipoprotein ; ox-LDL）是导致血管内皮损伤的重要因素。ox-LDL可增加内皮细胞对低密度脂蛋白的通透性;引起胞浆发生空泡变性;浆膜皱缩;导致内皮细胞凋亡并最终坏死。ox-LDL可抑制NO的合成;NO是维持内皮功能的重要调节因子;NO可促进内皮舒张;NO可调节血小板凝聚;防止动脉粥样硬化的发生。NO主要由内皮型eNOS合成。其中PI3K/Akt/eNOS是促进NO合成的主要信号途径。芒果苷对高脂导致的血管损伤具有一定的保护作用;但其作用机制未知。 方法：本研究采用ox-LDL诱导的HUVEC损伤模型;研究芒果苷对内皮细胞存活率、凋亡、NO水平、ROS水平等影响;及其对NO合成相关蛋白的影响;明确芒果苷调节NO发挥保护血管内皮细胞损伤的作用机制。 结果： 1. 与正常组相比较;ox-LDL诱导的HUVEC中细胞活力显著降低、乳酸脱氢酶活性显著升高。给予芒果苷处理后;血管内皮细胞活力显著增强、乳酸脱氢酶活性降低；并且芒果苷的这种作用可分别被PI3K抑制剂、eNOS抑制剂所抑制。 2. 与正常组相比较;ox-LDL诱导的HUVEC中细胞eNOS活性显著下降、NO水平显著下降、ROS水平显著升高。芒果苷可以显著升高 HUVEC中LDH、eNOS活性;升高HUVEC中NO水平;减少细胞中ROS水平；当芒果苷与PI3K抑制剂、eNOS抑制剂联合使用时;芒果苷对细胞eNOS活性、NO、ROS的调控作用与单一芒果苷组相比具有显著差异。 3. 与正常组相比较;ox-LDL诱导的HUVEC中PI3K、Akt、eNOS磷酸化水平下降;芒果苷可以显著升高HUVEC中Akt、eNOS磷酸化水平;抑制PTEN水平;但对PI3K无显著调控作用；当芒果苷与PI3K抑制剂联合使用时;芒果苷对细胞Akt、eNOS的调控作用显著降低；而芒果苷与eNOS抑制剂联合使用对Akt的调控作用仍然存在;但其对eNOS的调控作用消失。 第三部分 芒果苷通过PTEN/PI3K/Akt/eNOS通路调控血管内皮细胞NO的表达 目的：eNOS/NO是血管内皮重要的保护机制;而PI3K/Akt是eNOS上游重要调控途径。磷酸化的Akt可磷酸化eNOS;产生ser1177-eNOS促进eNOS活化;继而调节eNOS活性。而PTEN是PI3K/Akt负调控蛋白;PTEN发挥阻断PI3K/Akt通路的作用;与PI3K共同调节Akt途径。第二部分实验研究发现芒果苷具有保护ox-LDL诱导的HUVEC损伤作用;同时参与调控血管内皮eNOS及NO水平;并影响Akt、eNOS磷酸化水平;但其分子调控机制有待阐明。因此本部分实验采用PTEN基因沉默细胞;研究芒果苷对PI3K/Akt途径的调控机制。 方法：本实验采用PTEN基因沉默细胞;研究芒果苷对该细胞在ox-LDL模型中NO、eNOS活性及分子途径相关蛋白的调控作用;阐明其调控机体NO的分子机制与PTEN/Akt/eNOS途径的关系。 结果： 1. 与正常组对比;siRNA阴性对照及转染siRNA-PTEN的细胞活力、乳酸脱氢酶没有显著差异；而当给予模型细胞ox-LDL后细胞活力显著降低;乳酸脱氢酶显著升高;NO及eNOS活性均显著降低;与siRNA-PTEN细胞相比具有显著差异；当给予芒果苷后对细胞活力、乳酸脱氢酶、NO及eNOS活性均没有显著改变作用。 2. 与正常组对比;siRNA阴性对照及转染siRNA-PTEN的细胞Akt、eNOS磷酸化水平没有显著差异；而当给予模型细胞ox-LDL后细胞Akt、eNOS磷酸化有所降低；当给予芒果苷后对Akt、eNOS磷酸化水平与模型组相比没有显著差异。 结论： 1. 芒果苷可有效的改善高脂小鼠模型主动脉损伤;降低循环中血脂水平;减轻机体炎症反应。 2. 芒果苷可以通过上调血管内皮细胞NO水平;增强内皮细胞活力;降低细胞乳酸脱氢酶活性;从而改善ox-LDL对HUVEC的损伤。 3. 芒果苷通过抑制PTEN;激活PI3K/Akt/eNOS信号通路;上调血管内皮细胞NO水平;继而发挥保护ox-LDL对血管内皮损伤的作用。