作为目前临床治疗消化性溃疡类疾病的一线用药——质子泵抑制剂(proton pump inhibitors,PPIs),可以通过高效抑制胃酸分泌和清除消化道内的幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp),达到快速治愈消化性溃疡类疾病的作用。胃壁细胞中质子泵所驱动的H+与小管内K+交换是胃酸分泌的最关键步骤,而多为苯并咪唑类衍生物的PPIs可作为H/K-ATP酶的抑制剂,阻断这个关键步骤从而达到快速抑制胃酸分泌的作用。因PPIs类药物作用机理的特异性,故其在夜间抑制胃酸分泌、持续时间、疗效、患者用药方便程度等方面均优于以往临床治疗中常用的抑制胃酸分泌类药物-H2受体拮抗剂。泮托拉唑(pantoprazole)作为第三代PPIs由德国研制成功,并于上世纪90年代中期在南非成功上市,与上世纪80年代上市的第一代PPI奥美拉唑相比具有副反应小、使用剂量小、疗效好等特点。近年来,经研究发现泮托拉唑中起主要药理学作用的为其S型异构体——左旋泮托拉唑,故希望能将其开发成具有良好市场前景的治疗消化性溃疡药物。本课题旨在研究注射用左旋泮托拉唑钠单次或重复静脉注射给药的毒性作用,并与其消旋体药物注射用泮托拉唑钠的毒性进行比较,为其下一步临床试验的开展和重点观测指标提供依据。1.注射用左旋泮托拉唑钠单次给药对小鼠的毒性研究采用Bliss法,观察小鼠单次静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠后,在14d内出现的毒性反应,计算相应LD50,并与市售的注射用泮托拉唑钠比较毒性大小。结果表明：小鼠静脉给予单剂量注射用左旋泮托拉唑钠后即刻出现跳跃、抽搐、呼吸急促、步态不稳、排尿排便、翻正反应消失、俯卧不动等症状,给药后约10-40s内死亡。随着剂量的递减症状逐渐减轻,死亡率降低,各剂量组存活动物药后24h恢复正常,存活动物连续观察至药后14d,动物一般状况较好,无明显异常,体重增长正常。小鼠静脉给予单剂量注射用泮托拉唑钠后与注射用左旋泮托拉唑钠症状基本相同。剖检试验期间死亡小鼠以及观察期结束后存活小鼠,各主要脏器均未发现肉眼可见的形态学改变。小鼠单次静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠的LD50值为298.376mg/kg,95%可信限为272.172～327.103mg/kg;小鼠单次静脉给予注射用泮托拉唑钠的LD50值为223.970mg/kg,95%可信限为208.893～240.136mg/kg。LD50、LD95两两对比结果显示,注射用左旋泮托拉唑钠急性毒性反应明显低于市售的注射用泮托拉唑钠。2.注射用左旋泮托拉唑钠重复给药对大鼠的毒性研究观察SD大鼠连续5wk重复静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠(20、40、80mg/kg/d,每天1次)的毒性反应,预测供试品可能引起的不良反应,包括不良反应的性质、程度、剂量—反应和时间—反应关系、可逆性等；推测供试品重复给药的临床毒性靶器官或靶组织；预测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围；提示临床试验中需重点监测的指标；比较注射用左旋泮托拉唑钠与市售的注射用泮托拉唑钠毒性大小。结果表明：SD大鼠静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠,每天一次,连续给药5wk,在≥40mg/kg/d剂量下,可延缓大鼠体重的增长、减少雄性大鼠食量的摄入,并可对动物的一般症状产生一过性影响,表现为动物药后即刻出现呼吸急促、运动不协调、四肢无力、俯卧不动等症状,药后约6min恢复正常,随给药周期的延长,所出现症状的程度逐渐减轻,出现上述症状后恢复正常的时间逐渐缩短。恢复期间各剂量组存活动物一般状况良好,无明显异常,体重增长正常。主要的中毒靶器官为肝脏、肾脏,表现为动物体内蛋白和脂类代谢异常；BUN含量降低；肝脏、肾脏相对重量增大。以上毒性反应停药后皆可恢复。综合分析确定,注射用左旋泮托拉唑钠大鼠重复给药无毒反应剂量为20mg/kg/d,约为人拟用临床日最大剂量的17.5倍。相同剂量下注射用左旋泮托拉唑钠与市售的注射用泮托拉唑钠毒性基本一致。3.注射用左旋泮托拉唑钠单次给药对犬的急性毒性研究采用近似致死剂量法,观察Beagle犬单剂量静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠后在短期内出现的毒性反应,找出近似致死量或最大耐受量,为临床研究的剂量设置提供参考资料,并提供可能进一步深入观察的靶器官,并与市售的注射用泮托拉唑钠进行比较。结果表明：Beagle犬在给药过程中出现流涎,四肢剧烈震颤,给药后出现挣扎,强直,舌头伸出口外,继而昏迷,小便失禁,药后即刻至36h内出现死亡,随着剂量的递减症状逐渐减轻,死亡率降低,各剂量组存活动物药后5min-24h恢复正常,存活动物连续观察至药后14d,动物一般状况较好,无明显异常。剖检试验期间死亡动物以及观察期结束后存活动物,各主要脏器均未发现肉眼可见的形态学改变。注射用左旋泮托拉唑钠Beagle犬近似致死量范围为100-150mg/kg,无毒反应剂量为20mg/kgo注射用泮托拉唑钠Beagle犬近似致死量范围为150-225mg/kg,无毒反应剂量为30mg/kgo注射用左旋泮托拉唑钠对Beagle犬的急性毒性反应与市售的注射用泮托拉唑钠基本一致。4.注射用左旋泮托拉唑钠重复给药对犬的毒性研究观察Beagle犬连续5wk重复静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠(20、40、80mg/kg/d,每天1次)的毒性反应,预测供试品可能引起的不良反应,包括不良反应的性质、程度、剂量—反应和时间—反应关系、可逆性等；推测供试品重复给药的临床毒性靶器官或靶组织；预测临床试验的起始剂量和重复用药的安全剂量范围；提示临床试验中需重点监测的指标；比较注射用左旋泮托拉唑钠与市售的注射用泮托拉唑钠毒性大小,研究提取有效成分后毒性是否增强或降低。结果表明：Beagle犬静脉给予注射用左旋泮托拉唑钠,每天一次,连续给药5wk,在≥20mg/kg/d剂量下,可导致Beagle犬在给药中出现流涎、给药中或给药后出现震颤、四肢无力、站立不稳、食量减少等毒性反应,血清TC、TG升高,脂类代谢紊乱：在≥40mg/kg/d剂量下可导致犬出现俯卧不动、目光呆滞、水样便等毒性反应。恢复期间各剂量组存活动物一般状况良好,无明显异常,体重增长正常。主要的中毒靶器官为胃肠系统、肝脏。综合分析确定,注射用左旋泮托拉唑钠犬无毒反应剂量为≤10mg/kg/d,约为人临床日最大拟用剂量的9倍。相同剂量下注射用左旋泮托拉唑钠与市售的注射用泮托拉唑钠毒性基本一致。