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目的:探讨MTA1基因在乳腺癌浸润转移过程中可能涉及的分子机制,为应用RNA干扰技术治疗乳腺癌提供新的技术方案。方法:设计合成干扰MTA1基因的shRNA寡核苷酸片段,克隆到线性化的pGenesil-1真核表达载体上,测序鉴定。应用Lipofectamine 2000将该重组质粒分别转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,荧光显微镜评估转染效率,RT-PCR检测MTA1和MMP-9mRNA表达情况,免疫组化检测ERα和MMP-9表达,Western blot检测ERα蛋白表达情况,用Boyden小室体外侵袭实验检测转染前后两株细胞侵袭力的变化。结果:成功构建了重组质粒pGenesil-1/ MTA1;MDA-MB-231细胞平均转染效率为82.5﹪,MCF-7细胞的平均转染效率为78.2﹪。RT-PCR显示,转染重组质粒及用G418筛选3周后,MDA-MB-231和MCF-7两株细胞MTA1mRNA表达均较空白对照组有不同程度的下降,抑制率分别达到80.2﹪,58.7﹪;Western blot显示筛选3周的MDA-MB-231细胞ERα表达呈阳性,RT-PCR显示MDA-MB-231细胞MMP-9表达较空白对照组下降;免疫组化检测ERα,MDA-MB-231细胞核呈阳性表达,而MCF-7细胞ERα表达变化不显著。Boyden小室体外侵袭实验显示MDA-MB-231细胞体外侵袭力强,其侵袭指数为(76.3±2.4)﹪,MCF-7细胞体外侵袭力弱,其侵袭指数为(25.6±1.9)﹪,两者差异有显著性(P<0.05);转染pGenesil-1/ MTA1后,MDA-MB-231细胞体外侵袭力减弱,其侵袭指数为(27.2±2.1)﹪,和转染前相比差异有显著性(P<0.05);MCF-7细胞体外侵袭指数为(23.3±1.6)﹪,和转染前相比差异无显著性(P >0.05)。结论:1.重组质粒pGenesil-1/ MTA1的shRNA能有效抑制人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7细胞MTA1基因表达,且在表达较高的细胞中抑制效果更好。2.干扰MTA1基因后,MDA-MB-231细胞ERα表达得到逆转,表达呈阳性;MMP-9表达降低,其高侵袭转移能力亦减弱。3.利用RNA干扰技术对MTA1基因进行抑制不仅能应用于研究基因功能,而且为乳腺癌的治疗提供有意义的作用靶点奠定了基础。