桔梗的组织培养研究

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以MS和N6为基本培养基,配置不同激素种类和浓度的愈伤组织诱导和分化的培养基,以桔梗的叶片和茎段为外植体,比较基本培养基的组成、激素种类和浓度以及不同外植体对桔梗组织培养的影响的结果:以MS和N6为愈伤组织诱导培养基的基本培养基,只考虑愈伤组织的诱导率,MS的诱导率略高于N6的诱导率,但结合愈伤组织诱导培养基对愈伤组织分化的影响来看,N6明显好于MS基本培养基;诱导培养基中高浓度的2,4-D有利于桔梗愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的分化有明显的抑制作用;叶片外植体的愈伤组织诱导率和分化率明显好于茎段外植体。以MS和N6为基本培养基,以调节2,4-D浓度为重点,配制不同激素种类和浓度的培养基,并以桔梗的叶片、茎段和根段为外植体,探索通过诱导胚状体直接分化出小苗的结果:MS和N6为基本培养基,生长素中去掉2,4~D,添加NAA和IAA的培养基上可以直接诱导胚状体并分化出丛生苗和粗壮的根。在0.5cm左右方块的叶片或者1cm左右的茎段上可以获得十几棵乃至几十棵小苗,既提高繁殖效率,同时降低培养过程中可能发生的突变机率。供试25份桔梗种质资源,在相同的培养条件下比较组织培养效率的种质资源之间差异的结果:桔梗组织培养特性有种质资源之间的差异,25份种质资源中分化率最高的达到90%,最低的4296,但分化率主要集中在61-90%之间。小包子发育至单核靠边期的桔梗花药接在不同组合的培养基上诱导愈伤组织,把诱导的愈伤组织转移到分化培养基中培育来源于花药培养的单倍体植株,其结果:MS和N6为基本培养基都可以诱导桔梗花药来源的愈伤组织并分化出绿苗,但N6为基本培养基的诱导效果好于MS;不含2,4-D的诱导培养基中能够直接分化出小苗。从花蕾长度分别为1.6、1.8、2.0、2.2cm的桔梗子房中取出来的未授精胚珠接再4种不同的培养基上诱导愈伤组织,把诱导的愈伤组织转移到分化培养基中培育来源于未授精胚珠的单倍体植株,其结果:MS和N6为基本培养基都可以诱导桔梗胚珠的愈伤组分化出绿苗,但N6为基本培养基的效果好于MS;诱导愈伤组织的最好培养基组合是N6+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.2mg/L,花蕾长度为1.8cm时诱导率和分化率最高。
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