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目的:胃癌(Gastric carcinoma,GC)是全世界发病排名第五的癌症,并且死亡率位于肿瘤的第三位。胃癌患者的预后与肿瘤的分期和转移密切相关。C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是由肝脏合成的急性期蛋白,最初CRP是用来监测脓毒症患者并判断其预后,近年来,许多研究表明血浆CRP在肿瘤患者中普遍升高,并且血浆CRP水平与肿瘤的病理分期及预后密切相关,但是目前研究仅停留在临床的统计学研究,并且相关研究结果存在争议,CRP在胃癌组织及体外细胞株中的表达情况及是否在体外影响胃癌细胞尚不明确。本实验旨在利用免疫组化技术研究CRP在胃癌及癌旁细胞中的表达分布情况,欲初步探讨胃癌患者血浆高CRP是否部分来自肿瘤组织,并进一步探讨CRP在体外对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:本课题分两个部分:第一部分:检测临床标本胃癌组织和癌旁组织中的CRP的表达情况收集临床已确诊为胃恶性肿瘤患者术后的标本组织,同时收集肿瘤组织周围的正常组织,所取得的标本立即存放于低温冰箱中,利用免疫组化,测定并且分析癌及癌旁组织中CRP的表达分布差异。第二部分:胃癌细胞株中CRP的表达分布及其对该细胞株生物学行为的影响(1)利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术,扩增构建CRP慢病毒过表达载体,利用免疫荧光及免疫印迹试验(Western blot)检测过表达情况。(2)采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术,检测AGS、HGC-27、NCI-N87和MKN-45四种细胞株中CRP的表达情况,并且选择合适的细胞作为后续实验细胞。(3)病毒感染目的细胞,采用CCK8法、划痕实验、transwell迁移侵袭实验探讨目的细胞过表达CRP后,细胞恶性生物学行为的影响。结果:(1)通过免疫组化,我们发现CRP在胃癌组织中的表达是高于癌周围组织的。(2)CRP在胃癌细胞中普遍表达,AGS、HGC-27、NCI-N87和MKN-45四株细胞中均有表达,CRP在AGS与NCI-N87细胞中的表达丰度为中,在HGC-27与MKN-45细胞中表达丰度为低。所以我们选取HGC-27细胞株作为实验细胞。(3)使用过表达慢病毒载体感染目的细胞后,HGC-27细胞中CRP的表达含量明显增加。(4)使用过表达慢病毒载体感染目的细胞后,胃癌细胞中CRP呈过表达状态。这使得HGC-27细胞增殖、迁移等恶性生物学行为能力增加。结论:CRP在胃癌组织中的表达是高于癌旁组织的,并且CRP在胃癌细胞中普遍表达,本实验通过构建CRP过表达慢病毒载体,在HGC-27细胞中利用过表达慢病毒感染,结果发现病毒感染后CRP表达水平明显上调,并且HGC-27细胞的增值、侵袭、迁移能力增加。因此,上调HGC-27细胞中CRP水平可以促进细胞的恶性生物学行为。