嘧肽霉素调控水稻免疫系统的蛋白组学研究

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南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)是一种严重危害水稻的病毒新种,由我国第一个发现并对其进行鉴定和命名,属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus),近年来此病症在我国南方各省均有发生,给农业生产带来了重大损失。“嘧肽霉素”作为一种新型的抗植物病毒剂,已经应用于对SRBSDV的防治,田间试验结果表明:“嘧肽霉素”对SRBSDV具有较好的防治效果。然而,“嘧肽霉素”防治SRBSDV作用机制目前还不清楚,因此,探究“嘧肽霉素”防治SRBSDV的作用机制,明晰其作用的关键靶标蛋白及调节的关键通路,对基于方向更为明确的农药创制提供理论依据。本论文采用紫外分光光度法测定了“嘧肽霉素”对水稻中相关防御酶的活性的影响,实验结果表明:“嘧肽霉素”能够诱导水稻体内POD、SOD及CAT等防御酶活性提高;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法测定了“嘧肽霉素”对水稻体内相关防御基因表达量的影响,实验结果表明:“嘧肽霉素”能够诱导水稻体内Ascorbate POD、Glutathione POD、Chitinase及PR1等防御基因表达量的提高;同时,采用label-free的方法测定了“嘧肽霉素”对水稻体内蛋白质表达量的影响,实验结果表明:“嘧肽霉素”处理组水稻体内表达上调的蛋白有320个,表达下调的蛋白有155个,其中在水杨酸(SA)信号通路中起关键的调控作用的“钙调蛋白”表现为特异性上调表达;并采用qRT-PCR方法测定了“嘧肽霉素”对水稻体内SA信号通路中关键基因的表达量,实验结果表明:“嘧肽霉素”能够诱导水稻体内SA信号通路中ICS1、PAD4、PAL、EDS1及NPR1等关键基因表达量的提高。
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