牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫(Theileriasergenti)寄生于牛体内引起的一种血液原虫病。本试验成功分离提取了牛瑟氏泰勒虫全血基因组DNA，并根据Kawazu等发表的牛瑟氏泰勒虫P33主要表面蛋白基因引物序列合成一对引物，用PCR方法扩增出了长为868bp的基因片断。将PCR产物经回收纯化后连接到pGEM-TEasy载体上，构建了含有目的基因片段的重组质粒，然后将重组质粒转化入BL-21感受态大肠杆菌中。从培养物中提取的质粒经酶切和PCR扩增，筛选出的阳性克隆菌株，送到生物公司进行核苷酸序列测定。测得基因序列用生物软件(DNAstar)进行分析，与国外报道序列进行比较，与日本株(D11047)、韩国株(AF521557)、Theileria.buffeli(AF236096)、Theileria.orientalis(AB008369)基因序列同源性分别为99.7％、99.4％、86.5％、82.3％。 试验根据国内株牛瑟氏泰勒虫P33主要表面蛋白基因序列合成一对引物，用PCR方法扩增出499bp的基因片段。随机取5份样品，重复进行三次DNA提取、PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，结果相同，说明该方法稳定。特异性和敏感性试验结果表明，该诊断方法对牛边缘边虫、牛卵形巴贝斯虫、牛环形泰勒虫无交叉反应性；PCR产物序列测定，与模板基因序列有100％同源性；能检测出的牛瑟氏泰勒虫DNA最低浓度为18fg/ml，可用于本病的早期诊断、隐性感染和流行病学调查研究等。利用所建立的PCR诊断方法对75份被检样品进行检测，阳性率为72％，而血涂片染色镜检阳性率只有42.7％。 本试验为牛瑟氏泰勒虫进一步分子生物学研究奠定了基础。