溶血磷脂酸(LPA)是一种具有生物活性的磷脂小分子,能够通过细胞膜表面的六个受体(LPA1-6)介导细胞信号转导调节一系列生理药理过程。如,能够参与细胞的增殖、迁移、黏附、凋亡、分化与分泌等,并与伤口愈合、肺纤维化、肿瘤发生与发展等病理过程密切相关。此外,已证实LPA已成为卵巢癌的早期生物标记物,并在患者的腹水内LPA高浓度积累,这对卵巢癌的发展有何作用及其机理是个有趣而未解决的科学问题。所以,本研究在发现LPA能促进卵巢癌细胞的增殖与迁移的基础上阐明了LPA在上述作用中参与的LPA受体亚型,并进一步弄清了其信号通路。研究结果为卵巢癌治疗战略中指出潜在的靶位点。因此,相关研究对于生理活性脂质的调控功能以及与肿瘤发展之间关系等众多的理论和实践方面具有重要意义。实验过程中,我们利用CCK-8法测定细胞增殖、Micro chemotaxis chamber法测定细胞的迁移活性。采用Real Time PCR技术检测人卵巢癌细胞(A2780/HO8910) LPA受体表达谱,发现A2780和H08910中LPA1/LPA3受体优先表达,用药理学方法验证了LPA1/LPA3受体参与细胞增殖和迁移,进一步用RNA干扰技术证明了LPA3是主要的参与受体。用特异性抑制剂确定G偶联蛋白为Gai/o型偶联蛋白。在下游的信号通路研究中,用Western blot测定相关蛋白的表达,MAP激酶的特异性抑制剂确定了参与通路的MAPK类型为p38和ERK,参与的转录因子为NF-kB,而Bcl-2参与抗凋亡过程,同时也测得到MMP参与细胞的迁移机制。结论1、LPA是通过LPA3受体/Gai/o-MAPK-p38/ERK -NF-kB-MMP促进细胞的迁移。2、LPA通过LPA3受体的信号通路促进增殖。我们结果提示,LPA3受体可以作为治疗卵巢癌的一个潜在的靶位点。