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目的:通过观察哮喘小鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid BALF)、脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-4的变化,计算IFN-γ/IL-4比值,以了解哮喘发病过程中Th1/Th2比例的动态变化;通过观察哮喘小鼠肺组织中T-bet(T-box expressed in T cell)蛋白的表达情况,以了解哮喘发病过程中T-bet的动态变化。同时观察减毒活菌卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin BCG)对Th1/Th2、T-bet的影响。方法:健康昆明小鼠(雄性、3周龄、体重18-22克)随机分成三组,每组20只。每组又分成四个小组,每小组5只。1)哮喘组:以0.01%卵白蛋白(Ovalbumin OVA)0.1ml与佐剂2%氢氧化铝[AL(OH)3]0.1ml腹腔注射致敏,1%OVA雾化吸入激发建立小鼠哮喘模型。2)BCG干预组(以下简称干预组):OVA致敏/激发方法、剂量、时间同哮喘组,在OVA致敏前每只小鼠皮内注射BCG 0.025mg。3)对照组:以生理盐水代替卵白蛋白,进行腹腔注射和雾化吸入,方法、剂量、时间同哮喘组。三组的各小组分别于实验第0天、15天、23天、29天时采集标本,ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ、IL-4的水平,并计算IFN-γ/IL-4比值。取小鼠脾单个核细胞进行细胞培养,ELISA法检测脾单个核细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4的水平,免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠肺组织中T-bet蛋白的表达情况。结果:1.各组小鼠肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ随时间的变化:哮喘组在致敏后IFN-γ明显减少,初次激发后,IFN-γ明显减少,多次激发后,IFN-γ进一步减少,但趋势放缓;干预组在致敏后、初次、多次激发后,IFN-γ均较哮喘组增多,但仍低于对照组。2.各组小鼠肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IL-4随时间的变化:哮喘组在致敏后IL-4明显增多,初次激发后,IL-4水平进一步增多,多次激发后,IL-4继续增多,趋势不减;干预组在致敏后、初次、多次激发后,IL-4水平均较哮喘组减少,但仍高于对照组。3.各组小鼠肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ/IL-4比值随时间的变化:哮喘组在致敏后,IFN-γ/IL-4比值较对照组明显降低,初次激发后,IFN-γ/IL-4比值进一步降低,多次激发后,IFN-γ/IL-4比值继续降低;干预组在致敏后,IFN-γ/IL-4比值较哮喘组升高,与对照组相比,无显著性差异,初次、多次激发后,IFN-γ/IL-4比值均较哮喘组升高,但仍低于对照组。4.各组小鼠肺组织中T-bet蛋白的表达情况:哮喘组T-bet蛋白表达量在致敏后明显减少,初次、多次激发后,T-bet蛋白表达量亦减少,但动态观察哮喘组T-bet蛋白的表达情况,无显著性差异;干预组T-bet蛋白表达量在致敏后、初次激发后较哮喘组增多,与对照组比较,无显著性差异,多次激发后,T-bet蛋白表达量较哮喘组增多,但仍低于对照组。结论:1. OVA致敏后,Th1/Th2比例发生偏移。OVA激发后,Th1/Th2偏移进一步加剧。致敏前予BCG干预,不仅可以纠正致敏后的Th1/Th2偏移,而且能部分纠正气道激发后的Th1/Th2偏移。2. OVA致敏后T-bet蛋白表达减少,OVA激发后,T-bet蛋白表达量亦减少,但动态观察T-bet蛋白的表达情况,无显著性差异。致敏前予BCG干预,不仅可以增加致敏后T-bet蛋白的表达,而且能部分增加气道激发后T-bet蛋白的表达。