【摘 要】
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目的:通过血清蛋白质组学筛选绝经后骨质疏松生物标志物。方法:收集2018年1月至2020年12月在我院内分泌科及骨科住院绝经后女性（年龄≥45岁）161例,按照骨密度分为骨质疏松组（OST）（82例）非骨质疏松组（C ON）（79例）。测量身高、体重、腹围,计算身体重指数（BMI）。清晨空腹测量所有研究对象性激素（卵泡刺激素、黄体生成素、催乳素、雌二醇、睾酮、孕酮）、骨转换标志物（β-胶原特殊序列
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目的:通过血清蛋白质组学筛选绝经后骨质疏松生物标志物。方法:收集2018年1月至2020年12月在我院内分泌科及骨科住院绝经后女性（年龄≥45岁）161例,按照骨密度分为骨质疏松组（OST）（82例）非骨质疏松组（C ON）（79例）。测量身高、体重、腹围,计算身体重指数（BMI）。清晨空腹测量所有研究对象性激素（卵泡刺激素、黄体生成素、催乳素、雌二醇、睾酮、孕酮）、骨转换标志物（β-胶原特殊序列、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽、骨钙素、甲状旁腺素、25-OH维生素D）、血脂（总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯）。采用双能X线骨密度仪测定所有研究对象腰椎1～4（L1-L4）、股骨颈（Ne ck）、髋部的骨密度（BMD）值。并从两组研究对象随机选取各5例,采集血清进行定量蛋白质组学分析,分离出血清,酶解蛋白质,去除高丰度蛋白,并对其进行质谱分析,分别应用基因本论（GO）、直系同源蛋白簇（COG）、京都基因与基因组百科全书（KEGG）等对差异蛋白进行生物信息学分析。最后筛选出前50个互作关系密切的差异蛋白制作网络图。结果:与对照组相比,骨质疏松组年龄、身高、体重、腹围、BMI没有统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,骨质疏松组的β-胶原特殊序列水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,骨质疏松组的骨钙素、25-OH维生素D3、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽水平较高,甲状旁腺素水平较低,差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,骨质疏松组的甘油三酯水平较低,差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,骨质疏松组低密度脂蛋白及总胆固醇水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组相比,骨质疏松组雌二醇、睾酮水平较低,黄体生成素水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,骨质疏松组孕激素、催乳素水平较低,卵泡刺激素水平较高,差异无统计学意义（P>0.05）。在10例人血清样本中,通过质谱分析及生物信息学分析,筛选出116种差异表达的蛋白质,其中有79种蛋白显著下调,37种蛋白显著上调。GO分析显示,细胞骨架、肌动蛋白细胞骨架,细胞骨架蛋白结合过程,胞吐作用等高富集。在KEGG通路聚类分析中,细胞衰老通路高富集、高聚类。细胞衰老通路中IGFBP-3、ANT、CaM上调,TGF-β、PAI-1下调。IGFBP-3等上调蛋白及TGF-β、PAI-1等下调蛋白位于氧化应激分支的下游。ANT、CaM等上调蛋白位于细胞衰老通路中应激分支的中上游。CypA、FUucA、SPD2、AHSG等下调蛋白互作关系密切,ANT、GLUD1、Drp、ACTB、ACTN1、ALDOA、APP、SO D1、APP、WDR、TGF-β等上调蛋白互作关系密切。结论:这项研究应用人血清蛋白质组学,我们初步筛选出IGFBP-3、ypA、FUucA、SPD2、AHSG、ANT、GLUD1、Drp、ACTB、ACTN1、ALDOA、APP、SOD1、APP、WDR、TGFβ等50个蛋白可能成为绝经后骨质疏松血清标志物。绝经后可能通过氧化应激介导的细胞衰老通路引发一系列功能蛋白的变化,如IGFBP-3的上调诱发骨代谢中骨吸收功能的增强,进而导致绝经后骨质疏松的发生。
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