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【研究目的】重度烧伤作为一种严重的临床问题,能够摧毁人体的免疫系统,从而导致渐进性的免疫抑制状态。树突状细胞(dendritic cells,DCs)功能障碍,诱导T细胞激活的能力减弱,是导致该免疫抑制的主要原因之一。Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)和免疫系统激活相关,但关于重度烧伤患者外周血中树突状细胞(circulating DCs,cDCs)表面TLRs表达水平目前尚无充分的研究。本实验通过研究重度烧伤成人患者外周血树突状细胞表面TLR的表达改变、HLA-DR分子的表达变化趋势,结合患者预后,初步阐明重度烧伤患者急性期树突状细胞的功能异常及其TLR表达变化的临床意义。【研究方法】利用前瞻性病例对照研究检测烧伤总体表面积≥90%的重度烧伤患者循环树突状细胞表面TLRs的表达水平,并以健康志愿者作为对照组。自烧伤发生时开始,收集烧伤发生后第14天和第28天烧伤患者(n=10)和健康志愿者(n=8)的外周血样本,流式细胞术检测CD11c+树突状细胞表面HLA-DR、TLR2、TLR4和TLR9等分子的表达水平,酶联免疫吸附法检测患者外周血PCT、CRP和IL-6等炎症因子水平。按预后将烧伤患者分为幸存组和非幸存组,比较两组不同预后的患者树突状细胞TLR2、TLR4和TLR9的表达差异,以及树突状细胞HLA-DR、淋巴细胞计数、血清PCT、CRP和IL-6等炎症因子水平的差异,从而判断上述指标与患者预后的关系。【结果】所有烧伤患者在烧伤后最初的14天(急性期)时,幸存的患者与最终死亡的患者在TBSA、性别组成、年龄阶段及接受手术的次数等影响预后的临床因素均无差别。和同年龄层的健康志愿者相比,所有的患者外周血中树突状细胞表面HLA-DR显著降低,提示树突状细胞抗原递呈功能减退,而TLR2、TLR4及TLR9的表达水平在亚急性期(14d与28d)均显著提高。将烧伤患者按照预后分为幸存组和非幸存组后发现,幸存者TLR2和TLR4表达水平显著高于非幸存者,同时幸存者烧伤后28d时TLR2和TLR4表达水平显著高于14d的表达水平,而非幸存者28d时TLR2水平低于14d,TLR4在两个时间点的表达水平无差异。幸存者和非幸存者烧伤后14d和28d时TLR9的表达水平均无差异。提示烧伤后树突状细胞TLR2和TLR4表达水平升高,但是非幸存者TLR2和TLR4上升的能力不足,提示树突状细胞反应功能下降与预后不良有关。此外,烧伤后28d非幸存者树突状细胞HLA-DR水平低于幸存者,同时也低于烧伤后14d的水平。烧伤后28d血常规淋巴细胞计数低于14d水平,但是幸存者和非幸存者之间无差异。非幸存者外周血PCT水平显著高于幸存者,但是烧伤后28d和14d相比无显著差异。【结论】重度烧伤患者伤后外周血树突状细胞HLA-DR表达水平降低,TLR2、TLR4和TLR9表达升高。但是烧伤后非幸存者树突状细胞TLR2和TLR4上升的能力显著低于幸存者,提示烧伤后树突状细胞存在功能障碍,且与患者预后相关。