甲硫哒嗪协同孕激素对子宫内膜癌细胞的抑制作用

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研究目的:  体外探究甲硫哒嗪(Thioridazine,THIO)联合醋酸甲羟孕酮(medroxyprogestin acetate,MPA)对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响,对细胞PRB、EGFR、DRD2表达的影响,以及对EGFR/PI3K/AKT信号通路活性的影响,进一步探究THIO联合MPA对子宫内膜癌保守治疗的作用及分子机制。  研究方法:  通过CCK-8法观察不同浓度MPA对子宫内膜癌细胞生存率的影响,计算半数抑制浓度(IC50),选择MPA作用的最佳浓度;分别用MPA、THIO、THIO联合MPA处理子宫内膜癌Ishikawa和KLE细胞,CCK-8法、流式细胞计数(FACS)法观察药物对内膜癌细胞增殖、凋亡的影响;实时荧光定量PCR(qPCR)检测用药前后细胞PRB、EGFR、DRD2 mRNA水平变化;Western blot检测不同药物对细胞PRB、EGFR、DRD2蛋白表达的影响,以及对EGFR/PI3K/Akt信号通路的影响。  研究结果:  1.MPA抑制子宫内膜癌细胞生长,其作用呈时间、浓度依赖性;对Ishikawa细胞抑制增殖、促进凋亡(P<0.05),而对KLE细胞耐药。  2.THIO协同MPA对子宫内膜癌细胞Ishikawa和KLE有抑制细胞生长,促进细胞凋亡作用(P<0.05)。  3.THIO联合MPA上调Ishikawa和KLE细胞的PRB表达(P<0.05),显著降低PI3K/AKT信号通路中pAkt/Akt水平(P<0.01)。  4.THIO联合MPA显著上调Ishikawa和KLE细胞的DRD2表达水平,降低KLE细胞的EGFR表达(P<0.01)。  研究结论:  THIO协同MPA抑制子宫内膜癌细胞生物学活性,并提高了MPA耐药子宫内膜癌细胞对孕激素治疗的敏感性,该作用可能与多巴胺受体D2介导的PRB表达上调与EGFR下调,从而抑制PI3K/Akt信号通路传导相关。
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