动物机体内能转录出与功能基因m RNA方向相反的天然反义链转录本(NATs)。NATs与小分子RNA(mi RNA)可共同调控基因m RNA,使基因m RNA表达量处于动态平衡之中。生长激素受体基因(GHR)是动物生长轴中的关键基因。前人研究表明鸡GHR m RNA(GHR-S)受其天然反义链转录本(GHR-AS)和mi RNA Let-7b的调控。但GHR-AS、Let-7b和GHR-S之间是否有互作机制尚无报道。为了解GHR-AS、Let-7b和GHR-S间的互作机制,本研究以粤西怀乡鸡为研究对象,分离鸡胚胎原代肝脏细胞,通过S1酶保护试验和RNA稳定性试验等分析:(1)鸡GHR-AS、Let-7b和GHR-S的表达特征;(2)GHR-AS对鸡肝细胞增殖的影响;(3)鸡GHR-AS、Let-7b和GHR-S之间的互作机制。试验结果表明,怀乡鸡公鸡肝组织GHR-S、GHR-AS及Let-7b的表达量随鸡的发育逐渐升高。在鸡肝细胞中,GHR-S在胞质高表达,而GHR-AS在核内高表达。GHR-AS的半衰期超过4 h,而GHR-S的半衰期大约为2.5 h。此外,在鸡LMH细胞系中,GHR-AS的半衰期为6 h左右,而GHR-S的半衰期少于4 h,说明GHR-AS的稳定性高于GHR-S。在鸡肝细胞中过表达GHR-AS后,与对照组相比,肝细胞增殖速度加快,S期肝细胞比例增加,与此同时,GHR-S表达量显著升高;干扰GHR-AS后,降低肝细胞增殖速度,更多的肝细胞被阻滞在G1期,GHR-S表达量显著降低。GHR-AS与GHR-S部分序列反向互补,S1酶保护试验结果表明GHR-S与GHR-AS在GHR-S 3′UTR可形成RNA双链。在鸡肝细胞或LMH细胞中过表达GHR-AS(或GHR-AS 5′UTR)后,GHR-S的半衰期均被延长。共转染p GHR-AS(或p GHR-AS 5′UTR)和Let-7b mimics后,GHR-S的表达量高于转染Let-7b mimics组,表明GHR-AS对GHR-S具有保护作用。综上所述,GHR-AS影响鸡肝细胞增殖,GHR-AS和GHR-S可在GHR-S 3′UTR形成RNA双链,阻碍Let-7b结合GHR-S,从而增强GHR-S稳定性。