耐氨基糖苷类抗菌药物的鲍曼不动杆菌氨基糖苷酶和16S rRNA甲基化酶基因的检测

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目的:调查天津医科大学第二医院临床分离的鲍曼不动杆菌的药物敏感性,检测耐氨基糖苷类药物的鲍曼不动杆菌(Ab)中氨基糖苷修饰酶和16SrRNA甲基化酶基因的分布,探讨鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药机制,为临床抗菌药物选用提供实验室依据。方法:1.收集天津医科大学第二医院临床分离的鲍曼不动杆菌共136株,采用K-B纸片法测定对13种抗菌药物的敏感性,选取其中对庆大霉素及阿米卡星均耐药的鲍曼不动杆菌32株用K-B纸片法测定其对多粘菌素B、替加环素、米诺环素等19种抗菌药物的敏感性。2.选取对庆大霉素及阿米卡星均耐药的鲍曼不动杆菌32株,用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐氨基糖苷类抗菌药物的鲍曼不动杆菌8种氨基糖苷类修饰酶(aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅳ、aac(6’)-Ib、aac(6’)-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、aph(3)-Ⅵ)和6种甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD和nmpA),对PCR产物进行电泳、测序及进行BLASTn比对。结果:1.136株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南的敏感性分别为88.2%、72.1%、72.1%,对阿米卡星及庆大霉素的耐药率均为30.9%。2.32株对阿米卡星和庆大霉素耐药的鲍曼不动杆菌对其他氨基糖苷类抗菌药物(妥布霉素、奈替米星)均耐药,其中31株为多重耐药鲍曼不动菌占96.9%。3.32株耐阿米卡星和庆大霉素的鲍曼不动杆菌对多粘菌素B、替加环素、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素敏感率分别为93.8%,81.3%,62.5%,62.5%,对其他15种抗菌药物的耐药率均大于81.3%。4.扩增32株耐氨基糖苷类鲍曼不动杆菌的8种氨基糖苷酶基因共获得4种氨基糖苷类修饰酶基因,分别为15株aac(3)-Ⅰ、32株aac(6’)-Ib、32株aac(6’)-Ⅱ、29株ant(3")-Ⅰ,未扩增出aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅳ、ant(2")-Ⅰ和aph(3)-Ⅵ基因。5.32株鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因armA均为阳性,检出率为100%,未检出其它5种16S rRNA甲基化酶基因。结论:1.本研究提示鲍曼不动杆菌临床分离株对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感性高。2.本研究提示对阿米卡星和庆大霉素耐药的鲍曼不动杆菌对其他氨基糖苷类抗菌药物耐药性相等。在各种氨基糖苷类药物之间存在严重的交叉耐药。3.本研究提示耐氨基糖苷类鲍曼不动杆菌多为MDR-AB(96.9%),对多粘菌素B、替加环素、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素敏感性较高(62.5%—93.8%)。4.本研究显示aac(3)-Ⅰ、aac(6’)-Ib、aac(6’)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ基因和16S rRNA甲基化酶armA基因广泛存在于耐氨基糖苷类的鲍曼不动杆菌中,是鲍曼不动杆菌氨基糖苷类抗菌药物耐药的主要机制。
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