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苹果是我国主栽果树树种之一,其耐盐碱能力在落叶果树中属于中等。河北省滨海一带为轻度或中度氯化物盐土,部分平原为含硫酸盐的盐化土,在以上两类地区栽培苹果很难成苗,幼树普遍表现失绿现象,严重者甚至死亡。选育耐盐苹果砧木是提高苹果耐盐性的关键措施之一。利用诱变和生物技术相结合是一条有效的耐盐育种途径,而耐盐性鉴定是耐盐育种中的关键步骤之一。本试验以生根试管苗为材料,利用水培的方法,筛选适合作为苹果砧木早期水培耐盐性鉴定的指标,旨在建立一个苹果砧木耐盐性水培早期鉴定体系,为今后苹果砧木早期耐盐性鉴定提供一条可行途径。 1 以小金海棠[M.xiaojinesis chen et Jiang],八楞海棠[M.micromalus Mark.]和M7的生根试管苗为材料,分别设NaCl含量分别为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%共4个盐浓度处理,以不加NaCl为对照。在水培和盐处理条件下,对苹果砧木形态生长指标和生理生化指标进行观察和测定,结果表明:RSNa、k值(根中K+、Na+向地上部分运输的选择性)与盐害级别、株数比例、D值(盐害指数)及叶片SOD酶活性相结合可作为苹果砧木耐盐性水培早期鉴定的指标。因为所选育的苹果砧木耐盐性相当于或高于八楞海棠才有继续选育的价值,且在较高的盐胁迫下和较长时间内各指标鉴定效果更为明显,所以参考范围以八楞海棠为标准,选择0.3%和0.4% NaCl胁迫的第五天,参考范围分别为:最高伤害级别<3级,无害率>50%,D<O.3;SOD酶活性在0.3%NaCl胁迫下比对照大1.10倍,0.4%NaCl胁迫下比对照大1.04倍:RSNa、k值在0.3%NaCl胁迫下大于1.35,0.4%NaCl胁迫下大于1.14。参考指标为:叶面积扩展率、叶片中MDA含量、根活力、茎段组织细胞膜透性和叶绿素b含量。苹果砧木叶片中游离脯氨酸含量、K+含量和根系中[Na+]/[K+]与苹果砧木的耐盐性无关,不宜作为苹果砧木耐盐性水培早期鉴定指标。 2 以珠美海棠[M.zumi Rehd]和M7的生根试管苗为材料,设A、B、C和D共4种复盐处理,以不加复盐为对照。A:NaCl+MgSO4;B:NaCl+Na2SO4;C:NaCl+NaHCO3;D;NaCl+MgSO4+Na2SO4+NaHCO3。所有复盐处理中各种单盐浓度均为0.2%。结果表明:水培条件下,NaCl单盐筛选的各鉴定指标,在复盐胁迫下鉴定耐盐性不同的两种苹果砧木时仍然适用。相同浓度的MgSO4、Na2SO4和NaHCO3相比较,盐胁迫强度依次增大。 3 本试验采用自制简易水培室,并根据此水培室具体情况,摸索出一套与之相适应的耐盐性水培早期鉴定培养体系,为苹果砧木耐盐育种与生物技术相结合的早期鉴定开辟了一条新的途径。此水培体系主要包括:组培苗的准备、生根试管苗的准备、生根苗的锻炼和向水培室的移栽、水培培养及水培鉴定。关键步骤和技术为: ()生根培养基的筛选;(2)炼苗天数;(3)营养液初始 PH用 Ktal或民”。调至6.30;(4)培养中营养液浓度以 1/3剂量、l/2剂量和全量完全营养液的渐进加入培养方式:(5)进行耐盐鉴定时单盐处理以每天0.1删扰1浓度递增,复盐处理以每天0.2%复盐浓度递增,经4天同时达到预定浓度;(6)培养及鉴定过程中持续供氧。