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目的FRα是由FOLR1基因编码,在子宫内膜癌中高表达。FRα对叶酸具有高亲和力,并通过胞吞作用介导细胞外叶酸进入细胞内。细胞内的叶酸介导的一碳代谢与肿瘤的发生发展相关,因此,叶酸可能通过FRα进入子宫内膜癌细胞内影响子宫内膜癌的进展。本研究目的在于检测FOLR1在子宫内膜癌细胞中的表达,并探索了叶酸与FRα对子宫内膜癌细胞的作用及其相关分子通路。方法1.通过qPCR及western-blotting检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa及JEC中FOLR1、PR及雌激素受体(ERα和ERβ)的表达,探究子宫内膜癌细胞的受体表达特征。2.通过CCK-8、细胞凋亡实验、划痕愈合实验、transwell实验及细胞周期实验观察叶酸作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移和细胞周期的变化,探讨叶酸对子宫内膜癌细胞的影响。3.通过转录组测序及生物信息学分析探讨叶酸对子宫内膜癌细胞作用的通路及靶点。结果1.Ishikawa细胞的ERαmRNA和蛋白表达量及PR mRNA表达量高于JEC细胞,而PR蛋白表达量和ERβ、FOLR1mRNA及蛋白表达量与JEC细胞无明显差异。2.叶酸处理后Ishikawa细胞活性下降且随浓度升高细胞活性越弱。在Ishikawa细胞中,叶酸处理组(250uM,500uM)细胞凋亡率下降,在500uM叶酸处理后细胞活性下降。然而,在JEC细胞中,叶酸处理后(250uM,500uM)子宫内膜癌细胞周期(S+G2)期明显上升,250uM叶酸处理后细胞凋亡率降低。叶酸处理组(250uM,500uM)两种细胞的增殖、侵袭和迁移均无明显差异。3.通过转录组测序在叶酸作用下的Ishikawa细胞中找到136个差异基因,在JEC细胞中找到31个差异基因。构建了差异基因热图及火山图。通过PPI蛋白网络图在差异基因中找到两个核心基因EIF3CL和RPS17,并通过GO富集和KEGG pathway富集发现RNA transport通路可能是叶酸对子宫内膜癌作用的共同通路。结论1.FOLR1在子宫内膜癌细胞中表达,并且FOLR1mRNA表达量及蛋白表达量在Ishikawa及JEC中无明显差异。2.叶酸对子宫内膜癌细胞活性的抑制作用较弱,并与时间和叶酸浓度相关。叶酸处理不影响子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭、迁移,可能通过降低细胞凋亡率及提高细胞周期的(S+G2)期促进子宫内膜癌生长。3.叶酸对子宫内膜癌作用可能与核心基因EIF3CL和RPS17基因及RNA转运通路相关,核心基因RPS17及EIF3CL是否是诊断和治疗子宫内膜癌的靶点及RNA转运途径是否为子宫内膜癌进展的一条通路有待进一步研究。