反相高效液相色谱（HPLC）因其高效的分离分析能力，已被广泛的应用在生物化学、分析化学、临床医学、有机化学、环境监测和食品卫生的诸多领域，已经成为分析分析复杂化合物的最强手段之一。高效液相色谱虽然与传统液相色谱没有本质上的区别，但是其灵敏度和分离度都要高于传统液相色谱。高效液相色谱配备荧光检测器，用光衍生化的手段来实现对目标物的分析因其超高的灵敏度，也成为了高效液相色谱比较流行的手段。本论文主要设计合成了三种新型荧光衍生试剂，以及一种质谱增敏试剂。并运用实验室现有的衍生试剂实现了对酚类和三帖酸类的分析，具体工作如下：第一章：简单叙述了高效液相色谱的基本理论和国内外研究进展；介绍了荧光产生的原理及其荧光衍生化；列举了已经被广泛应用的荧光衍生试剂。第二章：三种荧光探针：10-(3-氰硫基丙基)-4,10-二氢-9-吖啶-9-酮、9-(3-氰硫基丙基)-9,9-二氢-4-咔唑、4-{(二氟硼烷基)[2-(吡啶-2-肼基)]甲基}苯胺的合成及其表征；一种质谱增敏试剂：4-苯基-1-(3-氰硫基丙基)-1H-[1,2,3]三唑的合成及其表征。第三章：以咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)为柱前衍生试剂，采用高效液相色谱荧光法测定水产品中的五氯苯酚。采用反萃取的手段对样品进行纯化，目标产物的回收率高于92.7%，相对标准偏差(RSD)小于8.9%。实验对温度、PH值及其衍生试剂的用量进行了优化，比普通的液相法检测灵敏度要高。第四章：以10-苯基-吖啶酮-2-磺酰氯（PASC）为柱前衍生试剂，采用柱前衍生高效液相色谱荧光法测定热敏纸中的烷基酚。样品采用C18固相萃取柱净化，三个目标化合物的平均回收率均高于80.6%，相对标准偏差(RSD)小于8.0%。对衍生反应温度、pH值、衍生试剂用量和固相萃取条件进行了优化，方法灵敏度为1.3–1.6ng/mL，较普通的液相色谱法有显著提高。这是国内首次对于热敏纸中的烷基酚含量进行的系统分析，结果表明购物小票等热敏纸普遍含有双酚A，极易对人类造成危害。第五章：以2-(5-苯并吖啶)对甲苯磺酸乙酯（BAETS）为柱前衍生试剂，采用高效液相色谱荧光法（HPLC-FLD）对宽叶羌活茎、根和叶中的三萜酸含量进行分析。对衍生的条件包括反应温度、缓冲溶液的选择、衍生化时间的长短和衍生试剂用量等进行了优化。结果表明K2CO3用量为10mg，衍生温度为90℃，衍生时间为30min时，荧光衍生效率最大。以乙腈和水为流动相，在C18反相柱上实现了对5种三萜酸衍生物的快速分离。方法线性相关系数均大于0.996，平均回收率大于90%，检出限在0.7-1.3ng/mL范围内。方法成功用于宽叶羌活各部位的三萜酸的含量分析，结果表明羌活根、茎和叶中均含有少量的三萜酸且根中三萜酸的含量最高。