45-60岁中年肺癌患者的预后分析

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:p_123_456
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目的回顾性分析183例中年肺癌患者(45-60岁)的病理特点对预后的影响。方法回顾性分析183例45-60岁肺癌患者的病历数据资料,分析性别、肿瘤部位、手术方式、分化程度、胸膜侵犯、淋巴转移、病理类型和TNM分期对这个年龄段肺癌患者预后的影响,用Kaplan-Meire法计算1年、3年和5年生存率以及总体生存率,对数秩和检验(Log-rank)法进行生存率显著性检验,多因素分析使用Cox比例回归风险模型进行,以评价各因素对预后的影响。结果183例中年肺癌患者的1年、3年和5年生存率分别是76.0%、33.3%和13.7%,单因素分析结果显示,不同组织学分类的肺癌患者总体生存率:鳞癌73.8%、腺癌75.5%、小细胞癌40.0%、大细胞癌50.0%以及其他病理类型75.0%(p=0.022);无淋巴结转移的患者总体生存率为79.0%,而有淋巴结转移的患者总体生存率明显低于无转移者,为67.3%(p=0.013);无胸膜侵犯的患者总体生存率为75.6%,有胸膜侵犯者的总体生存率为65.5%,明显低于前者(p=0.015);不同TNM分期的患者总体生存率分别为:0期100%,1A期90.9%,1B期72.5%,2A期80.0%,2B期89.5%,3A期63.6%,3B期46.2%,4期的总体生存率最低,为37.5%(p<0.001);不同的手术方式对总体生存率也有明显影响,接受肿瘤局部切除、肺叶切除、全肺切除和其他治疗的患者总体生存率分别为66.7%、78.2%、50.0%和50.0%(p=0.002)。而性别(p=0.455)、原发肿瘤部位(p=0.744)、肿瘤的分化程度(p=0.295)对患者的预后生存无明显影响。多因素分析结果显示,TNM分期(p=0.001)和肿瘤细胞病理类型(p=0.027)是影响中年患者肺癌预后的独立因素。结论中年肺癌患者中,肿瘤细胞的病理类型和TNM分期是与预后相关的独立影响因子。目的:通过短发夹RNA(shRNA)技术干扰肺腺癌细胞A549中Y盒结合蛋白-1(YB-1)表达,检测陷窝蛋白-1(Caveolin-1)的表达变化情况。同时观察下调YB-1的表达对A549细胞迁移、增殖和侵袭能力的影响。方法:针对YB-1 mRNA设计两条特异性shRNA序列及一条阴性对照(Negative Control,NC)shRNA序列,并将之克隆进质粒载体,用脂质体法分别转染肺腺癌A549细胞,沉默A549细胞中YB-1基因,甩Trizol法提取细胞总RNA,用全细胞裂解液裂解细胞提取细胞中的总蛋白。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)将细胞总RNA反转录成相应cDNA进行扩增,再将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析干扰组(sh-1、sh-2),NC组及空白对照组的YB-1和Caveolin-1在基因层面的表达变化情况;将提取的细胞蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分离,再将分离的蛋白转移至酯酸纤维素(NC)膜上,与相应抗体结合进行印记分析(Western blot),检测YB-1和Caveolin-1的蛋白表达情况;通过细胞划痕实验观测划痕后12小时、24小时的细胞愈合情况,计算细胞迁移率;侵袭小室实验(Transwell assay)利用聚碳酸酯膜和(polycarbonate membrane)和基质胶(matrix gel)模拟细胞膜和细胞质,通过计算穿膜细胞个数分析细胞的侵袭能力。采用统计学软件SPSS13.0对实验结果进行数据分析,采用两独立样本t检验或F检验,p<0.05为差异具有统计学意义。结果:1.RT-PCR结果显示:与空白对照组(A549)比较,干扰组sh-1和sh-2的YB-1干扰率分别为47%和52%(p<0.05),与之相对的Caveolin-1也分别下调56%和 58%(p<0.05)。2.Western blot结果显示,以A549为参照,sh-1与sh-2的YB-1抑制率分别达到35%和 40%(p<0.01),Caveolin-1 的表达相应下调 62%和 64%(p<0.05)。3.细胞划痕后24小时,空白对照组的细胞迁移率为64%,NC组细胞迁移率为55%,干扰组sh-1和sh-2的迁移率分别为19%和20%,空白组与NC组比较,p>0.05,差异无统计学意义,空白组与干扰组之间p<0.05,差异有统计学意义。4.侵袭实验中,24小时后各组穿膜细胞数分别为:空白对照组:(214±10)个,NC 组:(187±10)个,实验组 sh-1:(36±5)个,实验组 sh-2:(22±3)个。与对照组相比,干扰组细胞的侵袭能力明显下降(p<0.01)。结论:1.YB-1 shR]NA在沉默A549细胞中YB-1表达的同时,对Caveolin-1的表达也起下调作用。2.当YB-1和Caveolin-1的表达下调时,A549细胞的迁移和侵袭能力会发生抑制。
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