肿瘤的免疫耐受是恶性肿瘤免疫治疗难以取得预期疗效的重要因素之一。机体免疫耐受的产生机制极其复杂，但与肿瘤细胞特异性抗原的缺乏、APC的低水平抗原递呈，以及T细胞功能障碍关系最为密切。树突状细胞（DC）作为最重要的、功能最强的职业性APC和免疫反应的始动者，除了与肿瘤的发生发展有一定关系以外，已经成为免疫治疗的新载体。目前，应用DC治疗肿瘤的策略是在体外用细胞因子诱导扩增DC并负载肿瘤抗原，再与患者的CTL混合培养，激发特异性抗肿瘤细胞的CTL再回输给病人；或者是直接将体外扩增后的患者自体DC回输体内以提高机体识别和杀伤肿瘤细胞的功能。对DC来源、扩增途径及DC负载肿瘤抗原方面的研究是目前探索DC治疗方案的关键和人们关注的焦点。 本研究取材于对结肠癌患者进行干细胞动员和血细胞分离机分离获得的外周造血干/祖细胞标本，采用阴性选择的策略分离：Ficoll-paque分离PBMNC，E-rosetting去除T淋巴细胞，贴壁吸附法去除单核细胞和B细胞得到纯化的干/祖细胞；然后选择GM-CSF+IL-4方案诱导，体外培养扩增获得干细胞衍生的树突状细胞（SDC）。并通过光镜直接观察、细胞涂片染色、扫描电镜、流式细胞术免疫标记、混合淋巴细胞培养等实验研究了SDC的形态学、细胞表型及免疫激活功能等生物学特性，初步探讨了SDC的成熟影响因素及SDC摄取和呈递肿瘤抗原的可能路径。结果显示：造血干/祖细胞标本CD34表达阳性率为1.44％，CD38阳性率为69.3％；扩增得到的SDC可以达到（0.5～1）×10~8数量级以上；培养12～14天的SDC为未成熟期DC，但已初步表现出特有的树突状形态；细胞表型流式分析为HLA-ABC阳性率92.5％，HLA-DR为23.3％，CD80为10.2％，CD86为64.3％；混合淋巴细胞培养T细胞增殖的MTT显色结果，SDC与MoDC在不同的浓度下的刺激指数均比PBMNC高4～5倍，但二者之间比较无明显差异；刺激指数与DC∶T比例呈正相关，1∶10为最适比例：经LOVO细胞性肿瘤抗原致敏的SDC能诱导同源T淋巴细胞活化增殖产生Ch，激活的CIL体外对LOVO细胞具有高效而特异的细胞毒效应，而对无关肿瘤细胞则无明显的杀伤作用；单核细胞条件培养基和脂多糖均为有效的促成熟因子，能显著提高SDC的HLADR和＊＊so表达水平，但前者的提高幅度更大：而在肿瘤抗原呈递实验中，LOVO细胞的糖脂成分冲击致敏SDC后，细胞表面HLA－ABC表达水平与蛋白成分和全细胞抗原冲击致敏的效果无显著性差异，HLA．DR表达水平比未负载抗原的SDC显著提高。 实验结果提示：用血细胞分离机分离动员外周造血干／祖细胞体外定向诱导能制备均质性好，高表达抗原呈递分子和共刺激分子，刺激静止T淋巴细胞活化增殖的能力强大的树突状细胞，不失为制备瘤苗载体的可行方案。单核细胞条件培养基和脂多糖均可用于SDC的体外促成熟。而肿瘤相关糖脂抗原可能不仅仅是与甘露糖受体结合，而且可能被MHC－11类分子呈递，但是否能激发特异性免疫应答则尚待进一步探讨。