促进胰岛祖细胞分化为新的β细胞,有望从根本上解决胰岛β细胞损伤和数量减少的问题。因此,寻找新的分化诱导剂促进胰岛再生,对于有效缓解和治疗糖尿病具有重要意义。胰腺十二指肠同源框-1(PDX-1)在胰岛形成、自细胞分化及功能维持中具有至关重要的作用。本课题以PDX-1为目的基因构建高通量筛选模型,筛选出了能促进PDX-1表达,进而促进胰岛祖细胞分化为胰岛素分泌型细胞的化合物。首先,体外诱导PANC-1分化为胰岛样细胞团,该细胞团能表达胰岛特异基因,且葡萄糖刺激后能分泌胰岛素,移植到I型糖尿病小鼠肾包膜后,小鼠血糖可恢复到正常水平。表明,我们建立了将胰岛样祖细胞分化为胰岛细胞的方法。其次,运用蛋白免疫印迹法(WB)和免疫荧光法研究了 PDX-1在PANC-1细胞分化不同时间点的表达和分布。发现PDX-1主要在PANC-1细胞分化初期高表达并入核;而过表达PDX-1,可促进PANC-1分化及成熟。表明,PDX-1对PANC-1细胞分化具有重要作用。再次,以PDX-1为目的基因构建高通量筛选模型,筛选出能促进PDX-1表达的植物粗提物C754。运用液相色谱质谱联用和高效液相色谱法鉴定出C754中的主要组分为C1037,即穿心莲内酯。qPCR和WB研究C1037的活性,发现C1037可浓度依赖性上调PDX-1表达。最后,C1037作用于PANC-1细胞后,检测分化不同时间点胰岛特异基因的表达,以及胰岛样细胞团对葡萄糖刺激的胰岛素分泌。结果显示,C1037能加速PANC-1细胞分化为胰岛样细胞团(ILCCs),并促进ILCCs对葡萄糖刺激的胰岛素分泌。说明C1037能加速PANC-1细胞分化过程,为临床治疗糖尿病提供了新的候选分化诱导剂。