Q烟粉虱对番茄褪绿病毒的传播特性及其转录组分析

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烟粉虱Bemisia tabaci是我国重要的农业外来入侵害虫,主要通过刺吸植物汁液、分泌蜜露引发煤污病以及传播植物病毒等方式进行为害,其中通过传播植物病毒造成的危害最为严重。近年来,由烟粉虱传播的番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)成为番茄生产中的重要新生病毒,在我国主要番茄种植区暴发、流行,造成了严重的经济损失。本文系统调查了田间烟粉虱种群与ToCV发病流行关系,研究了ToCV、番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)不同侵染方式和杀虫剂对Q烟粉虱传播ToCV的影响,并从转录组水平分析了ToCV侵染对Q烟粉虱体内基因差异表达的影响,为田间病毒病和烟粉虱的有效防控提供科学依据。主要研究结果如下:1.通过系统的田间调查,发现ToCV以烟粉虱作为传毒介体完成传播,且ToCV发病率随烟粉虱种群数量的增加而升高。ToCV和TYLCV对不同抗TYLCV番茄品种的复合侵染普遍发生,有些品种的复合侵染率高达90%。此外,在山东省5个蔬菜产区采集的烟粉虱样品均可携带这2种病毒,且带毒率呈逐年增长趋势。2.ToCV和TYLCV复合侵染显著提高了Q烟粉虱对ToCV的传毒效率,相对于单侵染,复合侵染方式下Q烟粉虱对ToCV的获毒率提高了45%,传毒率提高了12%;复合侵染增加了ToCV在番茄体内的积累量,且单侵染方式下ToCV增殖高峰期发生在接种后14 d,复合侵染方式下ToCV增殖高峰期发生在接种后21 d。研究表明,复合侵染前期ToCV和TYLCV可能存在拮抗作用,侵染后期存在协生作用。3.毒力测定表明带毒Q烟粉虱(ToCV侵染)对螺虫乙酯和噻虫嗪的敏感性均有所下降,杀虫剂亚致死浓度对Q烟粉虱的获毒没有明显影响(P>0.05),但却显著提高了烟粉虱对ToCV的传播(P<0.05)。不带毒Q烟粉虱喜好选择ToCV侵染的番茄植株,而带毒Q烟粉虱则喜好选择健康番茄植株。经药剂处理后,不带毒Q烟粉虱仍喜好选择ToCV侵染的番茄植株,而带毒Q烟粉虱则表现出不同的选择:螺虫乙酯亚致死浓度处理后,带毒Q烟粉虱喜好选择ToCV侵染的番茄植株;噻虫嗪亚致死浓度处理后,带毒Q烟粉虱则喜好选择健康番茄植株。因此,杀虫剂和病毒因子同时存在会增加病毒在田间传播的风险。4.利用RNA-Seq技术对取食ToCV发病番茄不同时间点的烟粉虱进行转录组测序,通过DEG分析发现,在4个不同取食时间点烟粉虱大量的宿主基因被显著高表达,取食24 h时,基因差异表达最为显著。进一步分析发现,这些差异表达基因主要与信号转导、受体、溶酶体及细胞凋亡有关。GO分析发现,ToCV侵染导致烟粉虱体内大量基因异常表达,使宿主产生一系列的功能改变,侵染前期差异基因的功能主要富集在信号转导、跨膜运输、细胞自噬、酶活等;侵染后期主要富集在核糖体构成、跨膜转运、氧化还原等。KEGG分析表明,ToCV侵染诱导了烟粉虱代谢途径、信号转导途径、运输与分解代谢途径、溶酶体途径等通路基因的显著富集。
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