【摘 要】
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实验目的:Aurora A激酶在一些肿瘤中过度表达,导致染色质不稳定及磷酸化介导的p53泛素化及降解而引起癌变。高危型HPV16 E6通过与宿主细胞内的一系列细胞因子相作用导致细胞
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实验目的:Aurora A激酶在一些肿瘤中过度表达,导致染色质不稳定及磷酸化介导的p53泛素化及降解而引起癌变。高危型HPV16 E6通过与宿主细胞内的一系列细胞因子相作用导致细胞的永生化和行为上的转化。我们前期工作已证明HPV16E6和Aurora A相结合并增强Aurora A表达,在此基础上我们进一步研究了其生物学意义。实验方法:用HPV16 E6和/或Aurora A转染HEK293细胞,Western Blot检测对细胞p53蛋白相对定量的影响;p53、HPV16E6及Aurora A不同组合转染Saos2细胞,进行流式细胞周期分析及集落形成分析,检测HPV E6和/或Aurora A对p53诱导的Saos2细胞凋亡的影响;用慢病毒介导的shRNA敲减宫颈癌CaSki细胞的Aurora A,通过裸鼠体内成瘤实验验证Aurora A对宫颈癌细胞成瘤能力的影响。实验结果:蛋白降解实验及细胞凋亡实验结果表明,HPV E6通过提高Aurora A基因表达降解p53蛋白,抑制p53蛋白诱导的细胞凋亡。裸鼠体内成瘤实验表明HPV阳性的Caski细胞下调Aurora A表达,肿瘤形成体积小,说明Aurora A与肿瘤的形成相关。结论:HPV E6通过增强Aurora A的表达降低p53稳定性。Aurora A参与E6对p53介导的细胞凋亡的抑制作用,从而参与宫颈癌细胞的增殖,抑制其凋亡。
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