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猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis of swine, TGE)是由传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)引起的一种急性的、高度接触性的胃肠道传染病。传染性胃肠炎病毒属于冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)成员,主要引起病猪发热、腹泻、呕吐、脱水等临床症状。尤其是2周龄内仔猪病死率可高达100%,造成巨大经济损失,而疫苗免疫接种是预防该病发生的最有效的方法。制备出稳定、纯净、可靠、安全的毒种可为疫苗的研发奠定基础。在本研究中,对本实验室2012年分离保存并命名的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)SC-T株种毒进行毒力测定、RT-PCR鉴定、热稳定试验、pH3.0值稳定试验、氯仿敏感性试验、病毒核酸类型鉴定试验、纯净性检测。PT-PCR鉴定结果表明：目的基因条带大小和预期目的基因条带大小相同,目的基因测序结果与TGEV基因序列相符。热稳定试验、pH3.0值稳定试验、氯仿敏感性试验表明：该种毒对高温敏感,在50℃以下活性稳定,随着温度升高病毒滴度降低,pH3.0对种毒毒力不敏感,氯仿对种毒毒力敏感。病毒核酸类型鉴定试验表明：此种毒对5-溴脱氧尿核苷(BUDR)不敏感,为RNA病毒。纯净性检测结果表明：此种毒纯净性较好,且无细菌、霉菌、支原体、外源病毒的污染。将此种毒在无细菌、霉菌、支原体污染的纯净的、生长良好的猪睾丸传代细胞(ST细胞)上连续传代培养至第30代,选取病毒毒力较高且稳定的连续十代毒种,建立基础种子批和生产种子批,并从病毒毒力测定、安全性试验、免疫原性试验、特异性鉴定、纯净性检测五个方面对基础种子和生产种子进行鉴定。病毒毒力测定表明：随着猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) SC-T株毒种代数的增加,毒种病毒滴度呈现增大趋势,从第10代毒种到第20代毒种含量稳定且均在106.0TCID50/ml以上；安全性试验表明：接种免疫仔猪和对照仔猪,均无明显体温升高、食欲减退、精神萎靡等临床症状；免疫原性试验表明：接种免疫仔猪接受猪传染性胃肠炎病毒检验用强毒株攻毒后,体温略有升高后恢复正常,全部健康存活,对照仔组猪接受该强毒攻毒后精神萎靡、食欲减退甚至废绝、呼吸困难,最终其中3头死亡；特异性鉴定表明：正常细胞对照孔和病毒中和孔无细胞病变(CPE)出现,病毒对照组出现CPE,纯净性鉴定表明：各代次毒种均无细菌及霉菌生长,无支原体污染,外源病毒污染。以上实验结果表明猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) SC-T株种毒、猪睾丸传代细胞(ST细胞)满足制备疫苗相关要求。猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) SC-T株各代次毒种均能在ST细胞上稳定传代,所建立的基础种子批、生产种子批毒种,病毒毒力较高且稳定,具有较好的安全性、免疫原性、特异性,并且各代次毒种纯净性较好,满足《中国兽药典》、《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》相关要求,为今后开展的临床试验和疫苗研发奠定基础。