利用固定化啤酒酵母合成5′-核苷三磷酸和5′-脱氧核苷三磷酸

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两相法是一种适合于以卡拉胶为载体的高黏度的固定化生物催化剂成型方法。该方法操作简单,对催化剂没有毒性,所得固定化颗粒呈球形,直径分布均匀,菌体泄漏量小,并且具有很高的机械强度,完全能满足反应液有很高的离子强度的试验要求。另外两相法放大方便,特别适合于大规模的发酵工业生产。 利用к-卡拉胶-魔芋多糖复配胶包埋的固定化啤酒酵母细胞,分别由5-核苷一磷酸(NMPs)和5-脱氧核苷—磷酸(dNMPs)合成5-核苷三磷酸(NTPs)和5-脱氧核苷三磷酸(dNTPs)。在250mL摇瓶中加入20g固定化酵母细胞和20mL反应液((d)NMP40mmol/L,葡萄糖150mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液250mmol/L,硫酸镁10mmol/L),pH7.0,35℃,反应2.5h,NTP转化率达到80%,dNTP转化率达到90%。底物溶液添加NAD+后,该固定化酵母细胞可反复使用10次,NTP的转化率稳定维持在70%以上,而dNTP的转化率稳定维持在60%以上。
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