地高辛(digoxin)是临床上常用的中效强心苷类药物,能够增强心肌收缩力,增加心排出量且不增加心肌耗氧量,主要用于治疗各种急性和慢性心功能不全以及阵发性室上速、房颤、房扑等心律失常。地高辛的吸收不完全,吸收率约50%一70%,而且会受到肾脏功能的影响,血液中的浓度可因个体生物利用度的不同相差数倍。地高辛的治疗指数窄,治疗剂量已经接近60%的中毒剂量,当血液中浓度超过2.0μg/L时,即可出现胃肠道反应,如恶心、呕吐、腹泻等。因此极有必要对地高辛进行治疗药物监测(therapeutic drug monitoring, TDM)。早在1775年英国科学家就从植物中提取出“洋地黄”用来治疗心力衰竭,其通过与强心苷受体Na+-K+-ATP酶相结合而发挥正性肌力作用,因此可以推测在人体内也可能有相应的内源性配基。1979年Fishman首次从豚鼠脑组织中分离出这种类似洋地黄的物质。次年Gruber等从高血容量犬的血浆中分离出能抑制Na+-K+-ATP酶的低相对分子量物质,具有明显的排钠利尿作用,能交叉结合地高辛抗体,其抗原性在免疫学方面类似于洋地黄,故称为内洋地黄素(endoxin),即内源性地高辛样物质(endogenous digoxin-like substances, EDLS),也可称作内源性洋地黄样物质(endogenous digitalis-like substances, EDLS),内源性强心苷(endogenous cardiotonic steroids, CTS)。研究发现,内源性地高辛样物质广泛存在于人体的心、脑、肝、肺、肾、肾上腺、胎盘、肌肉等组织及血液、脑脊液和尿液等体液中。它是一种耐热的、极性较大的、生物学活性类似于洋地黄的小分子物质,是洋地黄受体Na+-K+-ATP酶的内源性递质,可显著抑制细胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性,产生强心、排钠利尿、缩血管等效应。如今尚未很清楚的认识到EDLS的本质,但因其结构上与类固醇激素如皮质醇、脱氢异雄酮等相似,故多认为它是一种带有类固醇结构的激素类物质。下丘脑、肾上腺、心肌等在EDLS的合成与分泌中发挥着至关重要的作用。高钠负荷与血容量扩张是刺激EDLS释放的主要因素。正常人体血液中含有少量的EDLS,但在某些病理情况下,如肾衰、心衰、高血压、先兆子病、肝肾移植、糖尿病、尿毒症等,EDLS的浓度将显著增高。由于EDLS能与地高辛抗体交叉性结合,所以若患者此时使用地高辛治疗,则随后的血药浓度测定结果并不能反映真实的血清地高辛浓度,导致“过高估计”(over-estimation),这将严重影响地高辛的给药剂量调整。本文利用EDLS能交叉结合地高辛抗体这一特点,采用荧光偏振免疫分析(FPIA)的原理,使用快速血药浓度检测仪(TDx)对EDLS进行测定。以慢性肾衰患者、心功能不全患者、失代偿期肝硬化患者、2型糖尿病患者各60名为疾病组研究对象,并以体检合格的30名健康人为对照组。采血前所有患者均未使用洋地黄类药物。研究对象均于早上空腹时经肘静脉采血,离心分离血清,冰冻保存,一次性批量测定。检测时精确吸取200μL血清样本,其内加入200μL地高辛血药浓度检测试剂盒中附带的地高辛去蛋白试剂(含有3%5-磺基水杨酸的50%甲醇溶液),漩涡混合15s,10000r/min离心90s,吸取上清液250μL至样品杯中,按照TDx操作步骤上机自动进行浓度测定。通过检测发现,各疾病组患者血清中的EDLS相对于正常对照组而言有显著的增高(P<0.05)。说明EDLS虽然含量甚微,但是的确在这些疾病的病理过程中发挥了一定的作用。用荧光偏振免疫分析的方法检测EDLS,具有灵敏度高(最小检出量为0.01ng/ml)、样品预处理简单、样品用量少、测定过程耗时较少等优点,适合临床对血药浓度的监测。