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自1963年首例临床肝移植开展以来，肝移植经历了40多年曲折但稳步发展的过程，随着肝移植术的日益完善，供肝短缺的问题日益突出。为拓宽供肝的来源，新的术式不断出现，如活体肝移植，劈离式肝移植，同时积极利用边缘性供肝。其中共同存在的问题是如何判断评估移植肝的功能恢复，预防避免原发性移植物功能障碍和原发性无功能。因此研究肝移植术后肝脏功能恢复的生物学特征，对于减轻移植肝的损伤，促进术后肝功能恢复具有非常重要的临床意义。本研究分为三部分，分别探讨了小鼠肝移植模型、冷缺血再灌注损伤模型及白介素-6基因缺陷小鼠(IL-6KO)肝移植模型的建立及外源性、内源性白介素-6(IL-6)对肝移植物功能恢复的重要作用。
第一部分小鼠全肝移植和全肝冷缺血再灌注模型研究背景：肝移植后缺血再灌注损伤及移植物功能恢复的分子生物学机理仍然不明确。对肝移植过程中损伤和恢复机制的认识建立在动物模型上，转基因小鼠的开发利用为认识这些机制提供了理想的模型。本实验目的是建立一稳定可靠的小鼠全肝移植和全肝冷缺血再灌注模型。
方法：以C57BL/6为供受体建立小鼠全肝移植和全肝冷缺血再灌注模型。移植物保存于4℃UW液，利用袖套(Cuff)技术行原位肝移植术。实验分两组：动脉化组和无动脉化组。移植术后观察动物存活时间，病理学DNA复制等指标观察组织损伤和肝脏再生反应。
结果：动脉化组在1、4、8、16小时的冷保存时间下30天的存活率是100％、100％、100％、100％；无动脉化组在1、4、8、16小时的冷保存时间下30天的存活率是100％、100％、100％、0％。短的移植物冷保存时间(1、4小时)，病理学检查发现组织损伤程度不严重，肝组织再生的反应也不明显，有轻微的细胞分裂增生。8小时的冷缺血损伤表现明显，再生反应也增强。16小时冷缺血组织损伤最重，可见广泛的肝坏死，肝移植物不能存活。肝动脉重建后，肝移植物可以耐受16小时的冷缺血损伤而存活。
结论：利用Cuff技术建立的小鼠全肝及冷缺血灌注损伤模型稳定可靠，存活率高，手术技巧和麻醉控制是小鼠移植物存活的关键。冷缺血时间长短、组织损伤和肝移植物存活密切相关。无动脉化的肝移植物可耐受长达8小时的冷缺血损伤，但不能耐受16小时的冷缺血损伤。动脉重建可以使小鼠肝移植物耐受16小时的冷缺血保存时间。
第二部分外源性IL-6对IL-6KO转基因小鼠肝移植功能恢复的影响研究背景：IL-6是肝组织再生的一个重要组成部分，应用大鼠的肝移植模型已经证实IL-6/信号转导转录激活剂3(STAT-3)途径是在冷保存损伤后肝移植物功能恢复中起重要的作用。本实验目的是建立IL-6KO转基因小鼠肝移植模型，并观察外源性IL-6对IL-6缺陷型转基因小鼠移植后，肝移植物再生反应的促进作用。
方法：以C57BL/6和IL-6KO小鼠作为供、受体建立IL-6KO小鼠全肝移植模型，移植物保存于4CUW液，利用Cuff技术行原位肝移植，不做肝动脉重建。实验分为6个组(每组6只)1.C57BL/6→C57BL/6；2.IL-6KO→IL-6KO；3.IL-6KO→IL-6KO+hIL-6；4.C57BL/6→IL-6KO；5.IL-6KO→C57BL/6；6.IL-6KO→C57BL/6+hIL-6。观察30天动物存活期，病理学检查：组织学DNA复制观察肝组织再生反应。
结果：用C57BL/6作为供肝来源的受体，无论是C57BL/6或IL-6KO小鼠30天存活率是100％。组织学检查发现溴脱氧尿核苷(BrdU)摄取增加，移植肝内IL-6水平上升。第2组受体3天存活率是2/6，第5组的7天存活率是1/6，Brdu的摄取和移植肝内IL-6水平未见明显增加。受体死亡原因是继发移植肝衰竭所致。但是在接受一次性皮下注射超级人工重组IL-6(hIL-6)后的受体小鼠，IL-6KO的肝移植物可以在受体内存活，表现为存活时间达到对照组的存活时间。
结论：本实验证明IL-6缺陷的转基因小鼠的肝移植物不能存活。肝移植物内的IL-6上调是启动功能恢复过程，保证移植肝存活的重要保证。外源性的hIL-6可以明显提高IL-6KO小鼠肝移植物的存活率，可能通过促进肝组织再生，逆转移植肝的再灌注损伤。
第三部分：骨髓细胞源性的肝移植物内部的IL-6对移植肝功能恢复的影响研究背景：IL-6是肝脏再生的必需成分，但是其细胞来源一直不明确，因此明确IL-6的细胞来源，对于移植后早期肝功能恢复具有重要的临床治疗价值。本实验应用骨髓移植和肝移植模型研究了对移植肝功能恢复起重要作用的IL-6是否源于移植物内部的骨髓细胞。
方法：应用骨髓移植模型，我们重建了受体小鼠的骨髓细胞，包括巨噬细胞。IL-6KO小鼠经致死剂的X线照射，然后行供体(表达IL-6的C57BL/6)来源的骨髓细胞移植。对照租C57BL/6受体也接受IL-6KO的骨髓细胞。骨髓移植后肝切除和肝移植观察肝组织的再生能力和肝移植物的存活率。
结果：骨髓移植模型成功地使雌性的受体表达雄性供体Y染色体SRY位点。儿-6阳性表达的小鼠接受IL-6KO的小鼠骨髓细胞后，肝切除和肝移植模型中表现为肝再生能力受到损害。相反，替代IL-6KO的小鼠骨髓细胞后，表达IL-6的小鼠受体重新恢复了正常的肝脏再生能力，表现为30天肝移植物存活率达到100％，伴有相应的组织学变化。
结论：源于肝内骨髓细胞的IL-6对于肝移植后的恢复肝脏的再生能力至关重要，其中移植肝内分泌IL-6的可能细胞来源是肝巨噬细胞。