人剪切修复基因XPD对p52及p21基因的影响

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目的:探讨人剪切修复基因XPD转染入HepG2盯癌细胞后p52和p21基因表达的变化以及对肝癌细胞生长的影响。方法:人肝癌细胞HepG2为靶细胞,XPD基因通过Lipofectamine2000脂质体转染HepG2。将细胞分为重组质粒HepG2-pEGFP-N2-XPD组(XPD组)、空载质粒HepG2-pEGFP-N2组(N2组)和HepG2空白对照组。分别用逆转录PCR(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法检测各组细胞中XPD、p52以及p21的mRNA和蛋白质的表达量,并用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测各组细胞的增殖能力。结果:XPD组中的p52的mRNA表达较其他2组显著下调,XPD和p21的mRNA表达较其他2组显著升高(均P<0.O1)。Western blot法检测显示在XPD组中p52的蛋白表达较N2组和空白对照组显著下降,而基因XPD及p21的蛋白表达较N2组和空白对照组显著升高(均P<0.01)。细胞增殖活力检测(MTT)显示XPD转染入HepG2后细胞增殖能力减弱。结论:XPD基因可以抑制癌细胞的生长和基因p52的表达,促进p21的表达。
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