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目的:糖尿病心肌病(DCM)和窦弓反射敏感性下降均可导致心脏猝死(SCD),但在糖尿病状态下,二者之间是否存在共同的发病机制目前尚不清楚。本文从miRNA角度探讨糖尿病诱发的心肌病和心脏压力反射敏感性功能障碍韵共调控机制,为糖尿病患者心源性猝死提供新的理论依据。 方法:分别从GEO和ArrayExpress数据库中下载STZ诱导的糖尿病大鼠心肌和背根神经节基因表达谱数据,通过t检验和交集分析,筛选出糖尿病大鼠心肌和背根神经节共差异表达基因。在HPRD数据库中查找与Gadd45α直接互做的蛋白。建立STZ诱导4周糖尿病大鼠模型,取左心室做miRNA芯片并筛选出差异表达miRNAs,把Gadd45α注释到靶基因数据库中,预测出miR-499与Gadd45α调控关系对,并用Western blot、real-time PCR、luciferase生物学实验进行后续验证。 结果:共筛选出4个糖尿病大鼠心肌和背根神经节共差异表达基因,在HPRD数据库中注释出Gadd45α的直接互作蛋白16个,其中11个有文献报道与糖尿病相关。经实验证实,在糖尿病心肌和疑核组织中,Gadd45α在mRNA水平表达显著上调,但在蛋白质水平表达显著下调。提示有后转录调控机制,进一步研究发现miR-499表达显著上调,同时,miR-499通过作用于Gadd45α靶基因3’UTR区从而发挥负性调控作用。 结论:结合生物信息学和生物学实验技术,筛选出4个糖尿病大鼠心肌和背根神经节共差异表达基因:Gadd45α、Ada、Txnip、Scn7a;过表达miR-499通过对Gadd45α的转录后抑制,使Gadd45α蛋白表达下调,可能是糖尿病心肌病和窦弓反射敏感性下降的共同发病机制。