人源性TREM-1-Ig融合蛋白对内毒素休克小鼠的保护作用

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目的 构建人源性髓样细胞表达的激活受体-1(TREM-1)胞外段与免疫球蛋白G1 Fc段(IgG1 Fc)融合基因并表达融合蛋白,评价TREM-1-IgG1 Fc融合蛋白对内毒素休克的保护作用。方法 设计引物分别从人外周血淋巴细胞及人单核白血病细胞系(U937)扩增IgG1 Fc段及TREM-1胞外段序列,通过酶切位点将两段基因连入载体pcDNA3.1/myc-his(-)B。通过转染小鼠成纤维细胞系(NIH/3T3)获得稳定表达融合蛋白的细胞株。BALB/C小鼠经腹腔注射1μg LPS和20mg D-Gal建立内毒素休克模型,并分别在给药前1h,给药后1h、2h、4h、6h时给予纯化的TREM-1-Ig融合蛋白,观察小鼠72h存活率。给予LPS和D—Gal后1h、2h、4h、6h、8h取小鼠眼眶静脉血,检测血清中TNF-α、IL-1β水平。结果 在LPS给药前后短时间内给予TREM-1-Ig融合蛋白,均可显著降低内毒素休克小鼠的死亡率,并可明显降低外周血TNF-α、IL-1β浓度(P<0.01)。结论TREM-1-Ig融合蛋白可缓解内毒素休克炎症反应进程,对内毒素休克小鼠有显著的保护作用。
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