【摘 要】
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背景和目的:全身炎性反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome ,SIRS)是多种疾病发展至多器官功能不全综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的前期
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背景和目的:全身炎性反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome ,SIRS)是多种疾病发展至多器官功能不全综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的前期表现,是许多疾病恶化的常见原因,其共同特征是自身的免疫失控而致的过激的炎症反应损伤。中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophils ,PMN)则是炎症过程中的重要效应细胞,在SIRS的发生、发展和转归中起着关键作用,正常情况下PMN以凋亡的方式死亡,并被巨噬细胞识别、吞噬而清除。PMN凋亡被认为是炎症反应得以无损伤收敛的一个重要机制,PMN凋亡的进程影响着炎症的发展和转归。如果其凋亡延迟,过度激活,致使大量蛋白酶、炎性介质和氧自由基释放,造成炎性反应过度和组织损害,形成恶性循环,从而加重SIRS。所以通过促进PMN凋亡控制炎症反应,是目前临床治疗炎症和感染性疾病的新观念。本实验旨在研究全身炎性反应综合征(SIRS)患者中性粒细胞(PMN)凋亡信号转导机制异常的分子机制,并进一步探讨应用大黄素(Emodin,EMD)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)和地塞米松(Dexamethasone ,Dex)干预后对SIRS时PMN凋亡的影响及其作用机理。方法:采集健康志愿者及SIRS患者外周血液5ml,从中分离PMN进行体外培养。共分为六个实验组:正常组,SIRS组,EMD干预组,IL-10干预组,EMD联合IL-10干预组,Dex干预组。各组PMN体外培养24h后,采用流式细胞技术、TUNEL技术、DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测PMN的凋亡情况;采用Western Blotting方法检测PMN凋亡相关蛋白Fas/FasL和Caspase-3表达水平的变化;以透射电镜观察不同处理组PMN的形态学改变。
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