黄果龙葵再生体系的建立及染色体核型分析

来源 :牡丹江师范学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanyuanji2008
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黄果龙葵(Solanum diphyllum L.)是茄属(Solanum L.)植物龙葵(Solanum nigrum L.)的一个变种。由于龙葵具有极高的药用价值和经济价值,因此黄果龙葵也被视为是一种极具开发价值的野生植物。但是黄果龙葵在常规繁殖中容易受到季节、环境等因素的影响,限制了人们对黄果龙葵的开发和利用,因此建立黄果龙葵再生体系和对黄果龙葵染色体进行核型分析,对黄果龙葵种质资源的保存和药用价值的研究,以及对黄果龙葵的系统进化、基因定位具有重要意义。本实验以黄果龙葵为实验材料,研究了不同培养基、不同激素类型及不同浓度配比、不同外植体对黄果龙葵愈伤组织的诱导、分化及生根培养的影响,分析了炼苗时间对试管苗移栽驯化的影响,筛选出各阶段最适宜的培养基,并最终建立黄果龙葵的再生体系。再以黄果龙葵根尖为实验材料,比较不同预处理时间、不同预处理液浓度和不同解离时间对染色体制片的影响,进而获得分散良好且清晰的有丝分裂中期细胞,进一步对黄果龙葵进行核型分析。主要研究结果如下:1、黄果龙葵再生体系的建立:黄果龙葵种子最佳消毒组合为75%乙醇30 s+升汞7 min,污染率和发芽率分别为26.6%和88.6%。黄果龙葵叶片最佳消毒组合是为75%乙醇30 s+升汞6 min,污染率和发芽率分别为10%和83.3%;在诱导愈伤组织方面,最佳外植体为黄果龙葵的叶片,诱导效果优于子叶和下胚轴。最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L,出愈率为78.3%;在愈伤组织分化方面,最佳外植体为黄果龙葵的叶片,分化效果优于子叶和下胚轴。最佳培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,分化率为44.4%;在生根培养方面,黄果龙葵最佳生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L和MS+NAA 0.2 mg/L,生根率均为100%;在炼苗移栽方面,炼苗最佳天数为4 d,成活率达到90%。2、黄果龙葵染色体制片及核型分析:制片方面,黄果龙葵根尖预处理的最佳组合为0.05%的秋水仙素溶液预处理2 h,染色分散性良好形态清晰;解离最佳时间为7 min,染色体分散性良好便于观察;核型分析方面,黄果龙葵为同源四倍体植物,染色体数目为4n=48,核型公式为K(4n)=48=48m,染色体全部为中部着丝粒染色体。臂比值范围为1.05-1.54,平均臂比值为1.27。相对长度范围为4.7%-11.97%,染色体长度比为2.54,臂比值大于2:1的染色体比率为0%,属于1B核型。核型不对称系数为55.62%。
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