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高效创新药物是防治疾病的主要手段,其研发成为当今医药领域的热点之一。然而,制约其研发的瓶颈之一为活性成分的筛选,因此,活性成分高效筛选方法的建立就成为该领域的重点问题。本论文以离子通道蛋白VDAC-1和G蛋白偶联受体β2-AR为例,建立了固定化VDAC-1和β2-AR色谱模型。采用VDAC-1色谱模型研究了VDAC-1与三种配体的相互作用,采用β2-AR色谱模型研究了其与七种药物的相互作用,荧光光谱法和计算机模拟技术对色谱法所得结果进行佐证,为膜蛋白与配体相互作用研究提供了方法学借鉴。在此基础上,将VDAC-1色谱模型对中药大黄中作用于VDAC-1的活性成分进行了筛选,证明该方法有望为膜蛋白与配体相互作用研究及中药活性成分高效筛选提供新方法,对高通量筛选复杂体系中药物活性成分具有重要意义。全文共分4章,作者的主要贡献如下：1、本论文将膜蛋白识别药物的特异性和色谱技术的高分离能力相结合,建立了两种VDAC-1色谱模型和一种β2-AR色谱模型,扩展了亲和色谱的应用。2、采用VDAC-1色谱模型研究了VDAC-1与ATP、NADH和NADPH的相互作用,荧光光谱法和计算机模拟技术对色谱法所得结果进行了验证,结果表明,三种配体以等摩尔结合于VDAC-1的核苷酸结合位点(NBS),结合常数在10-45℃内随温度升高呈减小趋势,静电作用力为结合过程中的主要作用力；采用β2-AR色谱模型研究了β2-AR和七种药物的相互作用,结果表明七种药物与β2-AR的亲和力大小排序为班布特罗>克伦特罗>妥布特罗>氯丙那林>沙丁胺醇>特布他林>甲氧那明,氢键作用力为七种药物与β2-AR的主要作用力,与文献结果一致。说明本论文建立的VDAC-1和β2-AR色谱模型可用于VDAC-1和β2-AR与药物的相互作用研究,为膜蛋白与配体相互作用研究提供了方法学借鉴。3、采用VDAC-1色谱模型,对中药大黄中的活性成分进行了筛选,鉴定蒽醌类物质芦荟大黄素,大黄酸,大黄素和大黄酚及鞣质成分儿茶素为大黄中作用于VDAC-1的活性成分,证明VDAC-1色谱模型可用于中药活性成分的筛选,为复杂体系中药物活性成分高通量筛选提供了新思路。4、在色谱理论方面,基于经典前沿分析理论,推导获得了可同时测定蛋白与配体结合常数,结合位点数和结合比的新公式。该公式具有结合参数信息量大的优点,能克服经典前沿分析、竞争置换和直接进样法缺乏结合比信息的不足,为色谱法全面测定蛋白与配体相互作用信息提供了理论依据。