【摘 要】
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氧化固醇结合蛋白相关蛋白(Oxysterol binding protein related protein,ORPs)是一类具有氧化固醇结合结构域的蛋白,在真核细胞中广泛存在。许多关于ORPs家族的功能研究都显
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氧化固醇结合蛋白相关蛋白(Oxysterol binding protein related protein,ORPs)是一类具有氧化固醇结合结构域的蛋白,在真核细胞中广泛存在。许多关于ORPs家族的功能研究都显示ORPs家族在细胞生命活动中起到重要作用。如调控脂质代谢,运输固醇类物质等。ORP9是这个蛋白家族中的一员,但对于ORP9的功能目前研究的比较少,只知道ORP9表达于巨噬细胞中,与血脂血糖的代谢有关,我们研究发现ORP9在肝癌组织中高表达,在正常肝组织中低表达,因此,我们猜测ORP9与肝癌的发生发展有关系,并希望通过对其进行深入研究,揭开ORP9的生物学功能。本研究先在肝癌组织中证明了ORP9的mRNA表达量和蛋白表达量要高于正常肝组织,然后证实了ORP9在肝癌细胞中的蛋白表达量要高于正常肝细胞。通过细胞划痕法、Transwell、Western blot证明了ORP9可以显著增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。Co-IP实验发现ORP9在肝癌细胞HepG2中与RhoA相互结合,免疫荧光共聚焦显微镜证实ORP9与RhoA在肝癌细胞中存在共定位。表明ORP9可能调节RhoA来影响细胞的迁移和侵袭能力。此外,构建敲除ORP9的MHCC97H稳定细胞系,用来检测ORP9对肝癌细胞在裸鼠体内的转移的影响,发现在敲除ORP9的细胞中,肺转移率显著降低。这些初步的研究结果为进一步研究ORP9的生物学功能提供了一定的线索,将有助于深入研究ORP9在肝癌细胞中的作用机制。
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