实验背景： 心血管疾病是危害人类健康的严重疾病，它是造成死亡的主要原因之一。2007年，根据我国流行病学调查，近50年来无论在农村或城市，心脑血管疾病的发病率和死亡率均呈上升趋势。根据目前已有的流行病学资料推测，到2020年，人类疾病死因排列顺序将有重大变化，但冠心病和脑卒中仍将是人类死因的第一位和第二位。到那时，估算全球冠心病死亡人数将自1990年的630万增至1100万；脑卒中自440万增至770万。 动脉粥样硬化是心脑血管疾病的病理生理基础，防治动脉粥样硬化是目前医学领域急需解决的一个重要课题。现已证实炎症在动脉粥样硬化斑块的形成和发展中起到关键作用。氧化低密度脂蛋白是一种存在于血浆中的危险因子，能促进炎症发生，引起动脉粥样硬化。脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp—PLA2)也称血浆血小板激活因子乙酰水解酶，是介导氧化低密度脂蛋白引起炎症和动脉粥样硬化的一个关键酶。脂蛋白相关磷脂酶A2是由炎症细胞产生，水解低密度脂蛋白中的氧化修饰磷脂，主要与循环低密度脂蛋白相关。近年来的研究认为脂蛋白相关磷脂酶A2是心血管疾病独立的风险预测因子。因此检测患者血浆Lp—PLA2的活性，应用Lp—PLA2抑制剂对其活性进行调控是一种新的，潜在的，非降脂策略治疗动脉粥样硬化的发展方向。 实验目的： 作为与心血管疾病密切相关的新的炎性标志物，脂蛋白相关磷脂酶A2逐渐成为研究热点。为了进一步更加方便地研究脂蛋白相关磷脂酶A2的生理特性及其在心血管疾病中的病理生理学作用，研究开发一种能检测其活性的试剂盒已成为必要。为此，我们合成了四种含有吸光基团的脂蛋白相关磷脂酶A2底物，为开发一种经济、快速及灵敏的脂蛋白相关磷脂酶A2活性测定试剂盒(分光光度法)做铺垫。 实验方法： 在适宜反应条件下，分别以1-十四酰基—2-氢—3-磷脂酰乙醇胺(1-Myristoy1-2-hydroxy—3-phosphoethanolamine，14-PE)、1-十四酰基—2-氢—3-磷脂酰甘油(1-Myristoy1-2-hydroxy—3-phosphoglycerol，14-PG)、1-十四酰基—2-氢—3-磷酸(1-Myristoy1-2-hydroxy—3-phosphate，14-PA)和1-十四酰基—2-氢—3-磷脂酰胆碱(1-Myristoy1-2-hydroxy—3-phosphocholine，14-PC)为模板，合成1-十四酰基—2-4-对硝基苯酚丁二酸酐—3-磷脂酰乙醇胺(1-Myristoy1-2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphoethanolamine，14-NPE)、1-十四酰基—2-4-对硝基苯酚丁二酸酐—3-磷脂酰甘油(1-Myristoy1-2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphoglycerol，14-NPG)、1-十四酰基—2-4-对硝基苯酚丁二酸酐—3-磷酸(1-Myristoyl—2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphate，14-NPA)和1-十四酰基—2-4-对硝基苯酚丁二酸酐—3-磷脂酰胆碱(1-Myristoy1-2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphocho line，14-NPC)四种含有吸光基团的化合物作为Lp—PLA2活性测定试剂盒的候选底物。然后用酶对不同缓冲液下的底物进行水解，筛选出吸光度变化最灵敏的一个做为Lp—PLA2活性测定试剂盒的候选底物。 实验结果： 1.薄层色谱显示我们已成功地合成了14-NPE、14-NPG、14-NPA和14-NPC。 2.得到Lp—PLA2水解14-NPE、14-NPG、14-NPA和14-NPC的吸光度曲线图． 3.经比较，14-NPA被Lp—PLA2水解的效果好，且吸光度变化最灵敏。 结论： 1.成功合成底物； 2.sn—3不同基团对底物吸光度有不同的影响； 3.14-NPA具有成为分光光度法测定Lp—PLA2活性试剂盒底物的可能。