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本研究旨在探讨不同浓度褪黑素刺激条件下对内蒙古白绒山羊毛囊干细胞分化过程中Notch信号通路组成、Notch信号通路调节基因及分化的毛囊细胞相关参考标记(可能作为Notch信号通路潜在的下游靶基因存在)的影响。初步确定褪黑素刺激条件下毛囊干细胞分化为毛囊细胞过程中调控Notch信号通路的最适的褪黑素浓度及主效作用受体,初步探讨褪黑素刺激后Notch信号通路各相关基因之间可能存在的联系,为Notch信号通路的相关研究提供一定的理论依据。1.探寻研究褪黑素对毛囊干细胞分化过程中Notch信号通路组成基因Notch1和Hes-1、Notch信号通路调控基因Deltex、Numb、TGF-β、分化毛囊细胞标记基因FGF5、 Versican、Pax6、HG (hair growth)。通过设立对照组(0mg/m、100pg/ml、 300pg/ml、 500pg/ml、700pg/ml五个浓度对毛囊干细胞进行处理,定期换液培养,并拍照观察细胞生长状况。分别提取0d、1d、3d,5d、7d、14d和21d的细胞cDNA为模板采用实时定量PCR方法检测九个基因的表达量,初步确定褪黑素刺激对毛囊干细胞经Notch信号通路起分化作用的最适浓度为500pg/ml。2、在最适浓度条件下(50Opg/ml),分别加入褪黑素受体拮抗剂4-P以及拮抗剂LUZ,探讨加入褪黑素受体拮抗剂后,Notchl、Hes-1、Numb、Deltex、FGF5、Versican、 TGF-β、Pax6、HG (hair growth)表达量的变化。试探讨对褪黑素受体起主要作用的拮抗剂4-P和Luz在拮抗褪黑素受体后各相关基因之间的可能存在的相互联系,初步确定褪黑素刺激对毛囊干细胞经Notch信号通路起分化作用的主效受体为MTLR2,为丰富相关Notch信号通路的研究及毛囊干细胞分化为毛囊细胞的发生发育分子机制提供相关理论依据。