人类8型疱疹病毒(HHV-8)，又称卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV），是致瘤性的γ2型疱疹病毒，与卡波西肉瘤等多种体腔淋巴瘤的发病相关。与其他的疱疹病毒一样，KSHV具有潜伏和裂解两种状态。KSHV的复制与转录激活蛋白(RTA)是病毒的立即早期基因ORF50编码的，是病毒由潜伏状态向裂解状态转换的关键性调节因子。RTA作为立即早期基因的产物，通过直接结合在靶基因启动子上或者与其他的细胞因子相互作用来激活靶基因的表达，使病毒进入裂解复制期。RTA与靶基因启动子的直接结合依赖其氨基端的DNA结合结构域(DBD)，通过DBD的DNA结合活性与启动子上的应答元件（RRE）相互作用，反式激活下游基因的转录和表达。　　 蛋白具有比核酸更多的化学和结构多样性，基因工程融合标签常用来检测和纯化蛋白。合适的融合标签的利用可以增加蛋白的可溶性、提高重组蛋白的产量，甚至促进融合蛋白的正确折叠。在某些情况下，His标签的位置对蛋白的纯化和结晶以及蛋白的稳定性有着非常重要的影响。　　 本文构建了包含两段RTA DBD基因的原核表达质粒，表达RTA氨基端1-273aa和1-320 aa的重组蛋白。两段长度各构建了带有不同位置的His6标签或FLAG标签的重组质粒，分别表达RTA-His6、His6-RTA-His6、His6-RTA-FLAG、FLAG-RTA-His6、His6-FLAG-RTA-His6。每个构建的质粒经测序正确后，转入大肠杆菌中诱导表达目的蛋白，并从中选择了His6-FLAG-RTA(1-273 aa)-His6、His6-RTA(1-320 aa)-His6、His6-RTA(1-320 aa)-FLAG进行了表达条件的优化。最终，通过变性纯化得到了部分纯化的His6-FLAG-RTA(1-273 aa)-His6;通过非变性纯化得到了部分纯化的His6-RTA(1-320 aa)-His6以及His6-RTA(1-320aa)-FLAG。纯化所得的蛋白可用于制备多克隆抗体、研究RTA与启动子的相互作用等，为以后的实验积累了材料。