郁金樱组培快繁及再生体系建立

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郁金樱(Cerasus serrulata var.lannesiana‘Grandiflora’)是蔷薇科(Rosaceae)樱属(Cerasus)落叶乔木,在众多樱花品种中,花色大多为白色、粉色或红色,郁金樱因其绿色花色而独特,其在盛花期和落花期都有极高观赏价值,在园林上开发潜力巨大。生产上樱花主要通过嫁接繁殖,但该繁殖方法存在占用空间资源大,成苗周期长、种苗价格高等问题,易受时间、气候、环境等影响,经多代繁殖后,易造成病毒积累,影响樱花的产量和品质。因此,应用植物组织培养技术,建立郁金樱无性快繁体系,是产业化、规范化生产优质种苗的最有效途径,也可对其他樱属植物的组织培养提供一定的参考。本试验主要研究结果如下:1.郁金樱茎段组培快繁体系建立为建立郁金樱茎段组培快繁体系,以郁金樱半木质化枝条为外植体,最适宜的消毒灭菌方案为:75%的乙醇溶液摇晃消毒30 s后转入0.1%(m/v)的升汞(Hg Cl2)溶液摇晃消毒6 min,外植体成活率可达46.67%;茎段最佳诱导培养基为:MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 IBA,诱导率为80.15%;最佳增殖培养基为:MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0 mg·L-1 NAA+0.05 mg·L-1 IBA,增殖系数可达3.45,最佳苗高增长培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 GA+0.05 mg·L-1 IBA,苗高平均增长量可达2.53 cm;生根培养的最佳培养基为不含任何激素的1/2MS培养基,生根率可达100%,采用两步生根法可有效增长苗高和促进根系生长,具体为在1/2MS+1.0 mg·L-1 NAA培养长出不定根原始突起后转不含任何植物激素的MS基础培养基,苗高平均增长量可达4.23 cm,最大生根数为15.81条;最佳炼苗时间为5 d,炼苗后移植到泥炭土:河沙:蛭石体积比为2:1:1的混合基质中,移栽成活率可达96.37%。2.郁金樱愈伤组织再生体系的建立为建立郁金樱愈伤组织再生体系,以多年生母株小叶、一年生嫁接苗小叶、腋芽诱导小叶和增殖一代小叶为外植体,探讨不同外植体和植物激素组合对郁金樱愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖和生根的影响。结果表明,多年生母株小叶的最佳消毒方案为:75%的乙醇溶液摇晃消毒30 s后转0.1%次氯酸钠(Na Cl O)消毒2 min,外植体存活率可达67.74%。四种外植体都能诱导出愈伤组织,除多年生母株小叶外皆分化出不定芽,外植体幼化程度越高,后期培养潜力越大。以增殖一代小叶为外植体最佳,其最适愈伤诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+1.0 mg·L-12,4-D,诱导率为96.22%;最佳分化培养基为MS+1.0mg·L-16-BA+0.1 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1TDZ,分化率为78.14%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA,增殖系数可达7.85,最佳生根培养基为不含任何激素的1/2MS培养基,可获得生根率为100%的再生植株。不同外植体获得的再生植株移栽成活后生长差异显著,以增殖一代小叶诱导的再生植株长势最佳。
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