竹叶黄酮提取物的抗前列腺炎和抗前列腺增生作用研究

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前言: 前列腺炎是泌尿系常见疾病之一,好发于青壮年,大约有二分之一的男性在其一生中会经受前列腺炎疾病症状。前列腺增生是老年男性的常见疾病,是增生的前列腺压迫前列腺尿道或引起膀胱尿道口梗阻,出现尿频、排尿困难,甚者尿液无法排出。50岁左右发病率为30%—50%,60—70岁发病率可达到75%。近年来前列腺炎和前列腺增生的发病率有上升趋势。由于前列腺炎和前列腺增生的病因病理复杂,目前尚未阐明,且无好的治愈药物和方法。因此寻找抗前列腺炎和抗前列腺增生的有效药物具有重要意义。 竹叶中含有大量的黄酮、酚酸、蒽醌、多糖、香豆素类内酯、特种氨基酸、芳香成分和锰、锌、硒等微量元素。竹叶黄酮提取物(BLFE)是从刚竹属淡竹叶(Phyllostachys)中提取的黄酮类化合物,其中黄酮类化合物含量为50%,主要成分是碳苷黄酮,以荭草苷(Orientin)、异荭草苷(Homoorientin)、牡荆苷(Vitexin)和异牡荆苷(Isoviextin)为主。药理研究已经证明,竹叶黄酮提取物具有抗自由基、抗脂质过氧化和防护DNA氧化损伤的作用,能显著降低血清甘油三酯含量,提高高竹叶黄酮提取物的抗前列腺炎和前列腺增生作用研究密度脂蛋白胆固醇(*OLC)的水平。中医古籍中记载竹叶可治疗诸淋症、淋痛、雇闭等症,现代中医临床也将竹叶用作为利水渗湿之药,用于前列腺炎和前列腺增生的治疗,但据我们所知,目前尚未见有竹叶黄酮提取物对抗前列腺炎和前列腺增生方面的药理作用研究方面的报道。目的: 本研究中我们选用体外抑菌和大鼠、小鼠多种炎症模型,观察竹叶黄酮提取物对常见泌尿系统致病菌的抗菌活力,以及对多种炎症的抑制作用:另选用丙酸絮丸素致小鼠前列腺增生模型,观察竹叶黄酮提取物对外源性激素引起前列腺增生的影响;并在幼年小鼠前列腺及性腺和副性腺的生长试验中,初步观察竹叶黄酮提取物对前列腺直接作用的同时,是否影响正常性腺的生长。本实验的目的是为竹叶有效成分进一步提取纯化和有效利用提供实验基础,最后寻找一种有效的抗前列腺疾病药物。探讨竹叶黄酮提取物的抗前列腺炎和抗前列腺增生作用。方法:l 体外抑菌试验(MIC测定)①化脓性链球菌:在灭菌 M-H肉汤中加入 10%量灭活小牛血清,再加人药物制成250mg/Inl浓度后,过滤除菌。以培养液按 2倍递次稀释,加入幼龄化脓链球菌液0.05ml总含菌量 10‘of…置 35℃温箱培养 20-24小时后,以观察其 MIC值。②粪肠球菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌:以药物对倍稀释法进行。将 M-H琼脂高压灭菌溶化后,冷却至 55 oC左右,各分别加入不同量之药物,使成为 250lug/Inl,125mg/ffil,625mg/ml,3125mg/thl,156mg/ml刀78rug/ml,039mg/ml,在各皿中滴加上述 6种幼龄菌液 005m兀总含菌量1dCf一以接种环涂成小园斑,使干后,复皿放35℃温箱培养16毛0小时后,以观 2竹叶黄酮提取物的抗前列腺炎和前列腺增生作用研究察其MIC值。2 巴豆油致小鼠耳廓肿胀试验 竹叶黄酮提取物剂量分别为 400lug/kg、200lug/kg、100mg/kg,灌胃给药,每天 1次,连续 7天,阳性药pl@美辛为 10lug/k,仅实验前灌胃给药 1次,对照组灌胃等体积水。末次药后1小时,小鼠右耳涂2%巴豆油002nilj只致炎,4小时后处死,沿耳廓剪下左右耳,以gTnm环钻冲下左右耳片,称重,以左右耳片重量之差,作为肿胀率。3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验 小鼠给药及分组同实验2。末次药后30分钟,小鼠右耳涂二甲苯005ml致炎,15分钟后处死,沿耳廓剪下左右耳,以glnln环钻冲下左右耳片,称重,以左右耳片重量之差,作为肿胀率。4 角叉菜胶致大鼠前列腺炎试验 竹叶黄酮提取物剂量同实验 2,阳性药蚓跺美辛为 12mghg,仅实验前灌胃给药1次,对照组和模型组灌胃等体积水。末次药后05小时,开始手术。大鼠乙醚麻醉,腹部消毒后,腹部正中切开约15cm,暴露前列腺腹叶,用45号针头向前列腺腹叶注射1%角叉菜胶生理盐水溶液002nd只,立即将前列腺回纳腹腔,即刻双层缝合腹腔。对照组行假手术。术后4小时,处死大鼠,解剖分离前列腺各叶,称取湿重。大鼠前列腺腹叶,以 10o/福尔马林固定,石蜡包埋,切片,HE染色,镜检。5 小鼠前列腺及附性器官生长试验 幼年小鼠,竹叶黄酮提取物剂量同实验2,每天灌胃1次,连续14天。以雌H醇为阳性对照,皮下注射雌H醇 05mg/kg,每 3天 1次,共 5次,同时雌h醇组和对照组,每天灌胃等体积水。于第15天,处死小鼠,解剖分离前列腺腹、侧。背各叶及储精囊、擎丸、提肛肌,并称取湿重。 3 竹叶黄酮提取物的抗前列腺炎和前列腺增生作用研究6丙酸睾丸素致小鼠前列腺增生试验 竹叶黄酮提取物剂量同实验2,每大灌胃1次,连续14大。以雌二醇为阳性对照,皮下注射雌H醇 05mg/kg,每 3天
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