论文部分内容阅读
粪臭素(3-甲基吲哚)是L-色氨酸在单胃动物后肠厌氧微生物作用下的主要降解产物,是肉仔鸡排泄物主要臭气化合物之一。本试验通过对不同生长时期肉仔鸡直肠中吲哚与粪臭素的产生量与肉仔鸡回肠、盲肠、直肠中吲哚与粪臭素的产生量进行分析,探究肉仔鸡粪臭素产生的基本规律。采用分子生物学技术分析肉仔鸡回肠、盲肠、直肠微生物组成的变化规律,研究与粪臭素产生有关的微生物学机理。本试验对肉仔鸡2-6周龄直肠鲜粪,6周龄回肠、盲肠、直肠中吲哚、粪臭素、乳酸和挥发酸的含量进行了测定。采用PCR-DGGE技术测定了6周龄肉仔鸡回肠、盲肠、直肠食糜中菌群结构及多样性,采用实时荧光定量PCR技术对回肠、盲肠、直肠食糜中总菌、大肠杆菌、乳酸菌和双歧杆菌数量进行了测定。试验结果表明：(1)肉仔鸡粪臭素产生的基本规律：肉仔鸡直肠鲜粪中吲哚、粪臭素、乳酸和乙酸的产量均随周龄的增长而增加。2周龄吲哚与粪臭素的产生量极显著低于4～6周龄(P<0.01),3周龄吲哚和粪臭素产生量极显著低于6周龄(P<0.01)；6周龄乳酸含量显著高于2周龄(P<0.05),3～6周龄乳酸含量差异不显著(P>0.05),乙酸含量各周龄之间差异不显著(P>0.05)；回肠到盲肠中吲哚和粪臭素的含量极显著增加(P<0.01),盲肠到直肠中吲哚含量极显著下降(P<0.01)、粪臭素含量显著下降(P<0.05),直肠中吲哚与粪臭素含量显著高于回肠(P<0.05)；盲肠中乳酸和乙酸含量极显著高于回肠、直肠(P<0.01),直肠中乳酸和乙酸含量高于回肠,但差异不显著(P>0.05)。(2)肉仔鸡不同肠段微生物区系组成：肉仔鸡盲肠菌群多样性指数极显著高于回肠菌群(P<0.01),直肠菌群多样性指数与盲肠、回肠无显著性差异(P>0.05)；盲肠中菌群丰富度极显著高于回肠菌群(P<0.01),显著高于直肠菌群(P<0.05)。不同肠段菌群均匀度之间无显著差异(P>0.05)；回肠菌群与盲肠菌群之间相似度最低,盲肠与直肠菌群间相似度低于直肠与回肠间菌群相似度,盲肠样本之间相似度最高,直肠样本之间相似度最低；盲肠有一条特异性条带,其相似菌为单形拟杆菌,盲肠与直肠有三条共有条带,与其相似菌为阴道乳酸菌和某两种节线菌属的细菌。(3)肉仔鸡不同肠段微生物数量：总菌数量：盲肠极显著高于直肠与回肠(P<0.01),直肠高于回肠,但差异不显著(P>0.05)；大肠杆菌数量：盲肠显著高于回肠(P<0.05),直肠高于回肠,直肠与盲肠、回肠之间差异不显著(P>0.05)；乳酸菌数量：由高至低依次为盲肠>直肠>回肠,不同肠段之间差异不显著(P>0.05)；双歧杆菌数量：由高至低依次为盲肠>回肠>直肠,盲肠显著高于直肠(P<0.05),回肠与盲肠、直肠之间无显著差异(P>0.05)。(4)肉仔鸡粪臭素产量与肠道微生物组成的变化关系：菌群多样性指数与吲哚、粪臭素、乳酸、乙酸的产生量之间均为极显著正相关(P<0.01)；菌群丰富度与粪臭素、乙酸的产生量之间为极显著正相关(P<0.01),与吲哚和乳酸产生量之间为显著正相关(P<0.05)。吲哚、粪臭素、乳酸和乙酸产生量与总菌数量之间均为极显著正相关(P<0.01)；大肠杆菌与这四种物质产生量之间均无相关性(P>0.05)；乳酸菌数量与粪臭素产量之间显著正相关(P<0.05)；双歧杆菌数量与粪臭素、乙酸产生量之间为显著正相关(P<0.05)。依据菌群的序列分析结果,推测单形拟杆菌、阴道乳酸菌、两种节线菌属细菌与吲哚、粪臭素的产生的有关。综上,肉仔鸡粪臭素的产生量随周龄的增长而增加；粪臭素主要在盲肠中产生,在回肠中的产生量最少。粪臭素的产生受到肠道菌群组成的影响,粪臭素的产生与菌群多样性、总菌数量之间高度正相关。