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一氧化氮（NO）作为内皮源性舒张因子（EDRF）的主要形式，在心血管系统的生理和病理生理中发挥着重要的作用。在脓毒败血症中发生心肌收缩功能降低与心肌中NO水平增高有关。在含巨噬细胞的培养液中单个心肌细胞收缩功能降低也与NO水平增高有关。NO可产生负性肌力作用，增强舒张功能，NO是在一氧化氮合成酶（NOS）的催化下，L-精氨酸（L-Arg）和氧分子作用生成NO和L-胍氨酸。NOS分为两大类，即原生型NOS（cNOS）和诱生型NOS（iNOS）。iNOS可被一些细胞因子如白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）诱导激活。细胞因子诱导产生的NO降低心肌收缩力，对心肌细胞是有毒性作用的。但是，细胞因子诱导心肌细胞死亡的确切机制尚不清楚。为了详细了解其机制，我们用培养的乳鼠心肌细胞为研究对象，观察了细胞因子（IL-1β，TNF-α、IFN-γ）对乳鼠心肌细胞有无凋亡效应。IL-1β呈时间及浓度依赖性诱导心肌细胞凋亡。本实验通过TUNEL染色，DNA琼糖脂凝胶电泳方法，流式细胞仪等方法均证实IL-1β诱导心肌细胞凋亡。细胞凋亡发生前iNOS表达增加，培养液中NO代谢产物（NOX）大量释放（5-8nmol/kg protein）。TNF-α和IFN-γ本身不能引起心肌细胞凋亡和NOX增加。IFN-γ可以使IL-1β引起心肌细胞凋亡发生提前。IL-1β引起的心肌细胞凋亡作用可被NO合成酶抑制剂所阻断。IL-1β引起的心肌细胞凋亡通过NO而起作用。 NO通过引起心肌细胞凋亡而发挥其素效应。NO供体（GSNO）呈时间及浓度依赖性引起心肌细胞凋亡。GSNO及细胞因子引起的细胞凋亡作用可以被抗氧化剂（N-acetykysteine和DTT）及半胱氨酸蛋白酶抑制剂ZVAD-fmk所中和。而cGMP依赖蛋白激动阻断剂KT5823不能阻断NO介导的细胞周亡，它们本身无细胞毒效应。亚甲蓝（MB）也可以阻断NO介 第四军医人学博士学位论文 一 导的心肌细胞凋亡，这种阻断作用是通过氧自由基的产生导致NO的减少 引起的。本实验表明NO诱导的心肌细胞凋亡需NO的氧化产物，随后激 话Caspases，最后导致心肌细胞凋亡。 IL－16在实验中证实能诱导心肌细胞凋亡。碱性成纤维细胞生长因子 （bFGF）早在 80年代末被发现，它是机体组织提取物中一种能促进生长的 活性物质，具有心肌保护功能。本实验研究bGFG是否能抑制IL．15诱导 心肌细胞凋亡及其机制，从而保护心脏功能；并测定其对P53、bgy、FSS、呼 C－myc及bclZ等几种基因产物水平的影响。本实验表明bFGF可以阻断IL1 p介导的心肌细胞凋亡作用。ILIp诱导心肌细胞凋亡的相关基因主要为 P53、Fas及C－myc。bGFF可以阻断几－1日诱导的P53、Fas及C－myc基因 表达而实现其心肌保护作用。