压力对髁突软骨细胞增殖及TGF-β1mRNA表达影响的体外研究

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[目的] 观察体外单层培养的髁突软骨细胞加载机械压力后增殖活性和转化生长因子β1mRNA(TGF-β1mRNA)表达在不同时点的变化;对压力刺激导致的TGF-β1mRNA表达与软骨细胞增殖之间的关系进行初步探讨。 [材料和方法] 选用新生SD大鼠的髁突软骨作为原代培养的组织来源,建立髁突软骨细胞有限细胞系;应用静压力加载装置对培养细胞加载强度为120g/cm~2的持续压力1h。分别于加力后0、6、12、18、24h收集样本,用流式细胞仪分析各样本中细胞的DNA含量和细胞周期并计算增殖指数;用原位杂交技术检测压力作用后细胞TGF-β1mRNA的表达,以彩色病理图象分析仪检测各样本表达的阳性率。对照组细胞除不加力外,其它培养条件和检测方法与实验组相同。 [结果] 强度为120g/cm~2的压力作用1h,停止加力后体外培养的髁突软骨细胞增殖活性和S期细胞百分比在加力结束时都较对照组增大(P<0.05),但在加力后12h恢复,12~24h内实验组细胞增殖指数和S期细胞比例与对照组保持相同的变化趋势和相似的水平;实验组TGF-β1mRNA表达在停止加力时(0h)也较对照组明显增强(P<0.05),但6h左右即恢复到与对照组相似的水平,之后6~24h内的变化与对照组比较无明显差别。硕士研究生学位论文l结论】强度为120留c时的压力作用lh后能促使体外培养裸突软骨细胞的增殖活性和TGF一p lmRNA的表达增强,但短期压力刺激后细胞增殖活性和TGF一旦lm丑NA表达的改变可在一定时间内恢复;TGF一pl可能部分地介导着压力刺激对裸突软骨细胞增殖的促进作用,其机理可能与应力作用致TGF一日1表达上调,促进了裸突软骨细胞增殖能力有关。
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