液质联用技术在蜱传脑炎代谢组学的应用研究

来源 :内蒙古民族大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li1xiang125
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目的探讨液质联用技术检测蜱传脑炎(TBE)患者外周血清代谢物,寻找特征代谢物作为TBE患者早期筛查、诊断检测指标。了解特征代谢物的代谢通路信息。方法选取30例内蒙古林业总医院的TBE患者作为实验组,30例同期健康体检者作为正常对照组。采用超高效液相色谱与质谱联用(UPLC-MS)技术平台检测血清代谢物。将数据利用Mzmine2.0软件进行前处理和归一化,应用SIMCA16.0软件构建正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型,对TBE组和正常对照组进行代谢物初筛。将代谢物的质荷比(m/z)输入到HMDB数据库及统计学分析筛选两组间的特征代谢物。通过绘制ROC曲线及计算特征代谢物的AUC值(以AUC>0.9作为评价指标)评价这些特征代谢物诊断TBE的效能。采用metaboanalyst线上软件分析,了解TBE患者特征代谢物关键的代谢通路。结果采用UPLC-MS技术,以OPLS-DA为区分模型,筛选出45种与TBE病程相关的代谢物,产物以脂类为主,包括26类脂类及1种脂类代谢中间产物,以及生物碱、脂肪酸、胆色素等。TBE组与正常对照组比较,有12种代谢物表达降低,33种代谢物表达升高。代谢物AUC>0.9的有19种,经分析确认溶血磷脂酰胆碱(15:0)(Lyso PC(15:0))、溶血磷脂酸(24:0/0:0)(Lyso PA(24:0/0:0))、磷脂酸(22:2(13Z,16Z)/18:1(11Z))(PA(22:2(13Z,16Z)/18:1(11Z))、磷脂酰乙醇胺(P-16:0e/0:0)(PE(P-16:0e/0:0))、磷脂酰乙醇胺(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))(PE(22:6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z))、磷脂酰丝氨酸(Mono Me(13,5)/Di Me(13,5))(PS(Mono Me(13,5)/Di Me(13,5))、磷脂酰甘油(18:0/20:3(5Z,8Z,11Z))(PG(18:0/20:3(5Z,8Z,11Z))、心磷脂(CL)、3-O-半乳糖神经酰胺(3-O-Sulfogalactosylceramide)9种代谢物可以作为TBE特征代谢物。这些特征代谢物的通路分别是:鞘脂代谢、甘油磷脂代谢、糖基磷脂酰肌醇(G PI)-锚定生物合成三条代谢通路。结论利用UPLC-MS技术平台检测TBE患者血清特征代谢物是有效的方法;确定的9种特征代谢物可能成为TBE早期筛查、诊断检测指标;鞘脂代谢、甘油磷脂代谢、糖基磷脂酰肌醇(GPI)-锚定生物合成三条通路为下一步研究脂类与TBE的关系提供了血清代谢组学信息。
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