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目的本课题通过获得高沉默效率的PTEN特异性siRNA,感染携带PTEN siRNA的慢病毒载体干扰PTEN表达,然后观察其对神经元轴突再生以及脊髓损伤修复的效果。方法筛选出高沉默效率的PTEN特异性siRNA序列,构建PTEN基因RNA干扰(RNA interference, RNAi)慢病毒载体,感染大鼠背根神经节细胞,随机分为三组：对照组(A), PTEN-sham组(B),PTEN-RNAi组(C),病毒感染后通过Western-blot技术观察PTEN基因沉默情况,并于感染后1周利用Image-Pro Plus6.0软件测量神经元轴突再生的长度。体内实验采用8周龄雌性Wistar大鼠60只,以Impactor Model-Ⅱ型脊髓损伤打打击器(10gx25mm)制作脊髓胸10(T10)损伤模型,造模成功后,实验动物随机均分为三组：对照组(A),PTEN-sham注射组(B),PTEN-RNAi注射组(C),各组分别于病毒注射后1d、3d、5d、1w、2w、3w、4w、5w、6w、7w、8w进行BBB评分；损伤后8周取材制备脊髓石蜡切片进行神经丝蛋白(Neurofilament protein200, NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein, GFAP)免疫荧光染色判断脊髓局部星形胶质细胞以及神经元变化情况。结果PTEN-siRNA慢病毒载体能够成功感染大鼠背根神经节细胞并能沉默PTEN蛋白的表达,PTEN-RNAi组神经元轴突再生的长度明显长于PTEN-sham组和对照组,且差异具有统计学意义(p<0.05)。脊髓损伤感染病毒后Id、3d、5d、1w、2w各组间大鼠BBB评分差异无统计学意义(p>0.05),损伤后3w起各时间点评分PTEN-RNAi组均明显高于PTEN-sham组和对照组,且差异具有统计学意义(p<0.05)。NF200染色结果表明,PTEN-RNAi组脊髓损伤周围神经元存活的数量比PTEN-sham组和对照组明显增多,差异具有统计学意义(p<0.05),同时发现神经元胞体明显较其他两组较大(p<0.05)。而GFAP染色结果表明,PTEN-RNAi组星形胶质细胞与对照组和PTEN-sham组之间差别无统计学意义(p>0.05)。结论慢病毒介导的siRNA能成功的感染大鼠背根神经节细胞并能持续的干扰PTEN蛋白表达,PTEN基因沉默能够显著的促进神经元轴突的再生,同时PTEN基因的缺失能增加脊髓损伤局部神经元存活的数量及神经元胞体的大小,对神经元起到保护作用,为脊髓损伤治疗的实验研究和临床应用提供了理论基础和实验依据。