结肠癌组织NPRL2表达及其临床意义研究

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背景和目的结肠癌是人类常见的消化道恶性肿瘤之一。随着生活方式的改变,近年来其发病率在我国有明显增加的趋势。结肠癌的发生、发展和演进是一个多步骤、多因素综合作用的复杂生物学过程,与一系列癌基因和抑癌基因的异常表达密切相关,其中抑癌基因表达的抑制是触发肿瘤发生的重要机制。NPRL2基因是新发现的人抑癌基因,研究发现该基因的失活与多种肿瘤的发生、发展关系密切。本研究选取结肠癌组织及其配对正常组织,通过采用RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学方法检测NPRL2mRNA和蛋白表达水平。并进一步探讨其与结肠癌临床病理特征之间的关系,了解NPRL2基因在结肠癌发生、发展中的作用,为结肠癌的临床诊断和预后判断提供新的线索。材料和方法选择40例结肠癌组织及其配对正常组织,液氮中速冻10min后置于-70℃冰箱保存。1.RT-PCR检测各组NPRL2mRNA表达2.蛋白质印迹法检测各组NPRL2蛋白的表达3.免疫组化检测各组NPRL2货白的表达4.分析NPRL2免疫组化结果与结肠癌临床病理因素的关系5.应用SPSS17.0处理数据,两种组织NPRL2mRNA和蛋白的相对表达量应用两配对样本t检验,NPRL2蛋白阳性率比较采用χ2检验,检验水准a=0.05。结果1.结肠癌组织中的NPRL2mRNA相对表达量(0.459±0.045)明显低于正常结肠组织(0.656±0.041),差异有统计学意义,t=15.124,P<0.001。2.与RT-PCR结果一致,结肠癌组织中NPRL2蛋白相对表达量为(0.271±0.015),癌旁正常组织中,NPRL2蛋白相对表达量为(0.588±0.051),差异有统计学意义,t-27.357,P<0.001。3.NPRL2蛋白阳性染色主要定位于细胞质中,少数胞核可见。NPRL2在肿瘤组织中NPRL2蛋白阳性率为32.50%(13/40),正常组织中阳性率分别为87.50%(35/40)。组间阳性表达率差异有统计学意义,χ2=17.802,P<0.001。4.NPRL2蛋白表达情况与结肠癌患者的性别、年龄、Dukes分期均无明显的相关关系(P>0.05),而与组织分级相关,高、中分化组的NPRL2日性表达率高于低分化组,P<0.05。结论1、在结肠癌组织中NPRL2mRNA和蛋白水平较正常结肠组织均明显将低。2、NPRL2在不同分化程度的结肠癌组织中的表达不相同,在高、中分化结肠癌中的表达明显高于低分化结肠癌。3、NPRL2基因在结肠癌发生过程中起着抑制作用,并可能参与结肠癌细胞的分化调控。
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