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本文通过线性连续梯度非变性电泳结合邻苯二酚发色法分离纯化了光棘球海胆(Strongylocentrotus nudus)体腔液上清中的酚氧化酶(PO)。结果显示:光棘球海胆体腔液上清中存在3种PO,在聚丙烯酰胺凝胶中与邻苯二酚反应分别呈现褐色、黄色和紫色,根据其分子质量从高到低依次命名为SnPO1,SnPO2和SnPO3。分析研究了PO的最适温度和pH、底物特异性、动力学参数、金属离子和抑制剂对酶活的影响。结果显示:光棘球海胆PO可有效氧化左旋多巴(L-DOPA)、多巴胺和对苯二酚,但不能氧化酪氨酸,表明该酶可催化邻二酚和对二酚类底物而不能催化单酚类底物,属于漆酶型酚氧化酶;SnPO1,SnPO2和SnPO3的最适温度分别为75℃、70℃和40℃,最适pH分别为7.0、9.0和8.0;光棘球海胆PO在沸水中孵育60min后活力显著增强表明SnPO1,SnPO2和SnPO3是嗜熱的;SnPO1活力可被Cu2+、Mn2+和Fe2+显著增强,被Pb2+、Cd2+、EDTA、DETC、亚硫酸钠和抗坏血酸抑制,而SnPO2和SnPO3却受Pb2+和Cd2+影响不大,表明这三种酚氧化酶是含铜的,并且SnPO1与SnPO2和SnPO3的活性中心可能不同。上述结果表明,SnPO1,SnPO2和SnPO3可能在光棘球海胆的免疫和生理过程中起不同的作用。通过生长曲线测定法进行了光棘球海胆PO氧化产物的抗菌特性分析。结果显示:以多巴胺为底物时,SnPO1的氧化产物对灿烂弧菌(Vibrio splendidus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有抗菌作用,SnPO2氧化产物对哈维氏弧菌、金黄色葡萄球菌和拟诺卡式菌(Nocardiopsis sp.)有抗菌作用,SnPO3氧化产物仅对哈维氏弧菌和拟诺卡式菌有抗菌作用;以左旋多巴为底物时,仅SnPO2氧化产物对拟诺卡式菌有抗菌作用;光棘球海胆PO氧化产物对假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)、希瓦氏菌(Shewanella baltica)和溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)的生长无明显影响。上述结果表明,在光棘球海胆中,PO氧化产物具有窄谱抗菌活性,多巴胺氧化产物的抗菌活力高于左旋多巴氧化产物,并且不同PO亚型的氧化产物具有不同的抗菌谱和抗菌特性。