水茄植株再生及其与紫长茄杂交F1代花药培养的研究

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水茄具有许多优良的抗性基因,通过原生质体融合可将这些优良的抗性基因导入栽培茄中,以提高栽培茄抗性,大量的供试材料则需利用水茄组培快繁技术获得。然而,获得的杂种后代F1很难被有效的利用,通过花药培养得到的植株后代能充分表现出双亲重组后的各种性状,再结合育种技术便能筛选到理想的基因型。本实验研究了激素配比对水茄愈伤组织诱导及分化的影响,并探讨了影响水茄与紫长茄杂交F1代花药培养的因素(如花药长度、花药消毒、预处理、激素配比等),旨在建立高效的水茄组培快繁体系和杂交F1代花药培养诱导体系,为创制DH系及新品种选育提供理论依据。主要结果如下:1、以水茄子叶为外植体,诱导愈伤组织和不定芽的最佳培养基均为MS+2.0mg/L6-BA+0.3mg/L NAA,愈伤组织诱导率高达100%,不定芽诱导率为85.0%,平均芽数6个,此培养基也适合水茄与紫长茄杂交F1代花药培养中不定芽的诱导。2、诱导水茄不定根的最佳培养基为MS+0.3mg/L IAA,生根率达到100%,平均根数9条。3、对水茄与紫长茄杂交F1代花蕾长度与小孢子发育时期相关性及愈伤组织诱导情况相关性的研究表明,当杂交F1代的花蕾长度为8.3-10.5mm,花药长度为5.6-7.3mm,花冠比萼裂基部高出1.0~2.0mm时,小孢子处于单核中晚期,此时期花药的愈伤组织诱导率最高,达到32.5%。4、分析消毒剂、处理时间对杂交F1代花药灭菌效果的影响。结果表明:70%酒精处理30s,再用5%NaClO滴加2滴吐温-20消毒15min,污染率为4%,褐化率为4%。5、激素配比不同对花药愈伤组织诱导率的影响也会有所不同。MS培养基中添加6-BA的愈伤组织诱导率比添加KT的诱导率高,且愈伤组织生长势较好,诱导花药愈伤组织的最佳培养基是MS+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA,诱导率达33.1%。6、杂交F1代花药进行4℃低温预处理2d和36℃高温预处理6d后,均可显著提高花药愈伤组织诱导率,诱导率分别为38.0%和48.4%,两者相比,花药在36℃高温下预处理6d,更有利于愈伤组织的形成。7、不同激素配比对花药愈伤组织增殖效果不同,KT的增殖效果优于6-BA,花药愈伤组织增殖的最适培养基组合为MS+1.0mg/L KT+0.1mg/L NAA,增殖系数为0.52。8、杂交F1代花药培养的较适分化培养基是MS+2.0mg/L6-BA+0.3mg/L NAA,分化率为10.5%,此培养基也适合水茄子叶愈伤组织的形成和分化。
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