骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)部分异常增生的克隆细胞在疾病演变中细胞周期抑制和细胞分化控制基因失表达,而导致细胞恶变。多种基因启动子区CpG岛高甲基化导致相应基因沉默,在MDS发生发展中起很重要的作用。我室于力等应用RLGS方法筛查出ZO-1基因可能是一个血液系统恶性疾病相关基因。并发现它的启动子区异常甲基化可能是恶性疾病发生发展的关键机制。ZO-1是膜结合鸟苷酸激酶家族(MAGUK)的成员,在维持正常胞旁屏障通透性及调节细胞增殖分化中起重要作用,且ZO-1的表达状况与肿瘤分化及癌演进密切相关。前期研究发现:在人白血病细胞系HL60中ZO-1基因启动子区呈高甲基化状态,该基因表达沉默。提示ZO-1基因与白血病发生发展密切相关,可能起到抑癌基因的作用。本文旨在探讨ZO-1基因异常甲基化在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中作为基因标志的临床意义。首先,我们以白血病细胞系HL60、一例MDS患者及一例健康人的骨髓原代细胞为研究对象,采用硫化测序的方法进行ZO-1基因启动子区CpG位点的甲基化状况分析。结果显示:(1)HL60细胞系CpG位点总阳性率为96.74%。(2)健康人原代骨髓细胞CpG位点总阳性率为0.93%。提示健康人ZO-1基因启动子区CpG岛呈低甲基化状态。(3)MDS患者原代骨髓细胞CpG位点的甲基化阳性率为6.51%。说明ZO-1基因CpG岛在MDS患者骨髓的恶性细胞中存在异常甲基化现象。(4)健康人与MDS患者原代骨髓细胞的甲基化阳性位点比例的差异具有统计学意义。提示ZO-1基因启动子区CpG岛的高甲基化状态可能是导致MDS发生的一个重要的因素。然后,采用甲基化特异性(MS)-PCR方法分析30例健康人、72例血液系统非恶性肿瘤患者及85例MDS患者骨髓标本的ZO-1基因启动子区甲基化状况。结果显示:(1)ZO-1基因在30例健康人标本中均呈完全非甲基化状态。(2)72例血液系统非恶性肿瘤患者骨髓标本中ZO-1基因也呈完全非甲基化状态。提示血液系统非恶性肿瘤疾病的发生与ZO-1的异常甲基化无关。推测ZO-1基因启动子区的高甲基化状态并不影响机体免疫功能。(3)MDS患者骨髓中ZO-1基因甲基化阳性率(56.5%)明显高于健康人和血液系统非恶性肿瘤患者,差异有统计学意义(p＜0.05)。(4)MDS各亚类病人骨髓ZO-1基因启动子区甲基化阳性率均高于健康人和血液系统非恶性肿瘤患者,其差异也具有统计学意义(p＜0.05)。说明ZO-1基因启动子区高甲基化在MDS的初始阶段就已存在,是MDS起病的关键因素。ZO-1基因的CpG岛异常高甲基化模式的改变在MDS病人骨髓标本中具有特异性,有助于MDS的诊断与鉴别诊断。总之,ZO-1基因甲基化模式的改变与MDS的发生发展密切相关,它可能是一个潜在的血液系统恶性疾病的相关基因及诊治靶点。