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研究背景:脊髓损伤后的免疫反应过程十分复杂,许多免疫细胞和细胞因子参与其中,这些细胞和因子共同决定着脊髓损伤后的恢复过程。目前为止,对于脊髓损伤后CD8+T淋巴细胞亚群的作用还不清楚。了解这些细胞亚群在脊髓损伤后的变化有利于明确其免疫机制,为脊髓损伤的治疗提供科学参考。目的:探讨脊髓损伤SD大鼠外周血和损伤局部CD8+T淋巴细胞亚群的变化规律。方法:采用纽约大学脊髓损伤仪制备脊髓损伤大鼠模型,在损伤前后的不同时间点,从尾部采集血液和用密度梯度离心方法分离损伤局部单个核细胞;运用流式细胞技术检测脊髓损伤SD大鼠外周血和损伤局部T淋巴细胞亚群。结果:1.脊髓损伤前后SD大鼠外周血总T细胞的变化规律脊髓损伤前SD大鼠即正常SD大鼠外周血中总T细胞占淋巴细胞的百分比为59.71±3.24。脊髓损伤1d,其百分比为46.89±4.44,是所有试验观察点中最低值。3d时其比例回升,达53.44±3.97,但仍处于较低水平,与1d比较无显著性差异(P>0.05)。5d后其比例恢复到正常水平,并一直维持到损伤后的第21天。脊髓损伤后28d和56d,其百分比分别为69.30±2.28和70.27±2.64。两者之间无显著性差异(P>0.05),但与其他时间点比较,28d的结果较其前的所有观察点结果增高,差异有统计学意义(P <0.05),而56d的结果仅和正常SD大鼠,脊髓损伤1d、3d、14d、21d比较差异有统计学意义(P <0.05)。2.脊髓损伤前后外周血CD3+CD8+T细胞的变化规律脊髓损伤前CD3+CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比为45.02±3.82,脊髓损伤后1d下降,为39.86±3.89,差异有统计学意义(P <0.05),但是3d后,其值又恢复到损伤前正常大鼠水平,28d其值达到高峰,差异有统计学意义(P <0.05)。3.脊髓损伤前后外周血CD3+CD8+T细胞中CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+亚群的变化规律SD大鼠脊髓损伤前外周血CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+占CD3+CD8+T细胞的百分比分别为65.43±4.07和34.57±4.07。损伤后CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+的变化趋势正好相反。损伤后1d,3d,7d,14d,28d和56d,与损伤前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。损伤后5d,CD3+CD8+CD28-百分比降为49.50±4.82,为所有观察时间点中的最低值,而CD3+CD8+CD28+百分比则升为50.50±4.82,为所有观察时间点中的最高值,和损伤前、损伤后3d,7d,14d,28d,56d比较,差异有统计学意义(P <0.05)。损伤28d时,CD3+CD8+CD28-的比例较损伤后1d,3d,5d,14d,21d增高,差异有统计学意义(P <0.05),损伤后56d的百分比较损伤前,损伤后1d,3d,5d,21d增高,差异有统计学意义(P <0.05);而损伤28d后,CD3+CD8+CD28+的比例较损伤后1d,3d,5d,14d,21d降低,差异有统计学意义(P <0.05),损伤后56d的百分比较损伤前,损伤后1d,3d,5d,21d降低,差异有统计学意义(P <0.05)。4.脊髓损伤后局部CD3+CD8+T细胞的变化规律脊髓损伤后1d,浸润到损伤局部的CD3+CD8+T细胞占CD3+T细胞的百分比为40.55±1.59。损伤后3d,5d,7d,14d,28d其比例分别为38.84±4.71、47.57±15.79、50.07±1.97、37.70±8.85、55.14±5.56和44.78±3.26,和损伤后1d比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。脊髓损伤后56d,其值升高,为70.85±7.16,和脊髓损伤后1d,3d,5d,14d,28d比较,差异有统计学意义(P <0.05)。5.脊髓损伤后局部CD3+CD8+T细胞中CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+亚群的变化规律脊髓损伤后1d,损伤局部浸润CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+占CD3+CD8+的百分比分别为为69.87±6.00和30.13±6.00,损伤后1d,3d,5d的百分比两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。脊髓损伤后7d,CD3+CD8+CD28-结果为95.81±0.90,是所有观察点的峰值,CD3+CD8+CD28+出现下降,结果为4.19±0.90,是所有观察点的最低值,和损伤后1d,3d,5d比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。之后,CD3+CD8+CD28-一直维持在较高水平,结果分别为:14d为92.52±1.00,21d为89.49±3.40,28d为88.44±4.10,56d为95.11±0.40,CD3+CD8+CD28+一直维持在较低水平,结果分别为:14d为7.48±1.00,21d为10.51±3.40,28d为11.56±4.10,56d为4.89±0.40。此四个观察点分别和7d相同,和损伤后1d,3d,5d分别比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论:1.脊髓损伤后,SD大鼠外周血CD8+T细胞有增高的趋势,而在损伤局部也能够检测到CD8+T细胞的浸润,提示CD8+T细胞可能参与脊髓损伤的病理过程。2.脊髓损伤后,SD大鼠外周血CD8+CD28+T细胞有一过性的升高,但是该细胞亚群在损伤局部的却不占优势,而CD8+CD28-T细胞亚群在损伤局部却占优势。提示脊髓损伤后,局部浸润的CD8+T细胞可能主要起免疫调节作用。